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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 菌株的保藏与活化
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开心小迷糊

金虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by 紫薯培根 at 2015-04-10 22:09:00
先用液体培养基(如营养肉汤培养基)进行复活，然后再划线分离试试

液体培养基里没有长出来，估计是要重新保藏了
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11楼2015-04-15 17:00:13
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开心小迷糊

金虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by 金圣功成 at 2015-04-08 10:58:54
15%-30%的甘油总浓度保种啊，我常用25%的，也有用50%的也没问题，你这是常见菌不会那么苛刻的，还有如果转了质粒的菌，甘油别太高。楼主先液体摇菌做个鉴定后再重新保种吧。祝顺利

你们是用甘油保藏后放置于多少度冰箱里？是-20还是-80度？？？？
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12楼2015-04-15 17:01:10
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开心小迷糊

金虫 (小有名气)
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7楼: Originally posted by xuyunjian at 2015-04-10 23:31:32
你是把菌放到-80℃吗？可能是放到-20℃，存放时间过长，导致菌体死亡

我们是放在-20度的冰箱里的，才不到一个月哦！难道放-20度冰箱里，时间长了会死吗？求解
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13楼2015-04-15 17:02:50
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原罪的祷告

金虫 (正式写手)

慧耘生物
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9楼: Originally posted by 开心小迷糊 at 2015-04-15 16:57:00
我觉得换个方法试试，用新的菌株新的方法再保藏吧，你们都是用什么方法保存的？...

绿脓杆菌保藏条件比较奇怪的，不能四度保藏，会自溶的。。养好的菌要常温保藏，或者-20度甘油冻存
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14楼2015-04-15 17:07:22
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开心小迷糊

金虫 (小有名气)
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14楼: Originally posted by 原罪的祷告 at 2015-04-15 17:07:22
绿脓杆菌保藏条件比较奇怪的，不能四度保藏，会自溶的。。养好的菌要常温保藏，或者-20度甘油冻存...

我想问一下，你们是用多大浓度的甘油保藏的？谢谢啦
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15楼2015-04-15 17:11:56
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金圣功成

新虫 (正式写手)
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12楼: Originally posted by 开心小迷糊 at 2015-04-15 17:01:10
你们是用甘油保藏后放置于多少度冰箱里？是-20还是-80度？？？？...

常用时就放-20°，保险起见，-20°和-80°都放些吧
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生活不可能像你想象得那么好，但也不会像你想象得那么糟。我觉得人的脆弱和坚强都超乎自己的想象。有时，我可能脆弱得一句话就泪流满面，有时，也发现自己咬着牙
16楼2015-04-16 00:06:00
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金圣功成

新虫 (正式写手)
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10楼: Originally posted by 开心小迷糊 at 2015-04-15 16:59:17
25%的甘油和水吗？我准备用50%的甘油保藏试试，看接到液体里能不能长，十分感谢...

甘油终浓度，你用50%的话，那就一半甘油一半菌液，然后冻存
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生活不可能像你想象得那么好，但也不会像你想象得那么糟。我觉得人的脆弱和坚强都超乎自己的想象。有时，我可能脆弱得一句话就泪流满面，有时，也发现自己咬着牙
17楼2015-04-16 00:08:01
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原罪的祷告

金虫 (正式写手)

慧耘生物
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15楼: Originally posted by 开心小迷糊 at 2015-04-15 17:11:56
我想问一下，你们是用多大浓度的甘油保藏的？谢谢啦...

一般15%-30%都可以的，我们也是25%，这个配置起来比较方便
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18楼2015-04-16 16:40:37
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