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乐乐hzj

新虫 (初入文坛)

[求助] pcr问题 已有6人参与

请问大家pcr需要在无菌室操作吗，我用的超纯水是直接从机器里接的那种，pcr空白对照组总是有条带，引物没问题，刚买的，mix也是新的，这是为什么呢。

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1楼 2015-04-03 18:25:06
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lxzk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-04-03 23:05:56
不需要。条带如果不是引物二聚体的话还是要换水换枪头，试试买点商品化的纯水，和预包装的枪头，很多公司有。另外枪也要清洁一下，用的时候小心，不要把枪里面的污染带出去。

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2楼2015-04-03 19:17:16
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

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枪头最好买带滤芯的
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
3楼2015-04-03 19:28:01
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-04-03 23:06:26
水，枪头高压灭菌，不要把试剂交叉污染了就行。

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采菊东篱下，悠然见南山。
4楼2015-04-03 20:22:21
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爱上太阳

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-04-03 23:06:55
水和枪头，PCR管都要灭菌，否则会有污染

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5楼2015-04-03 20:29:51
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yangyang1991

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-04-05 22:26:43
我就是出现了这种问题。
换了mix就好了，不加模板的没有出来。但是其他的也没有出来（应该是我样品的问题），换的是宝生的。。。。

你可以试试。。。

你的目的条带是不是潮霉素之类的序列？
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6楼2015-04-04 09:41:54
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
实验室环境中存在污染，可能存在实验台，移液枪管，枪头盒底，水，分装顺序和习惯等。建议彻底清扫实验台，用75%酒精擦洗；清洗枪，特别是枪管里面的残留；使用灭菌的ddh2o；混好样，加空白并盖好盖，然后先分装mix后加样。。。
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7楼2015-04-06 11:19:54
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