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fiseah

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白电泳 已有2人参与

最近跑蛋白电泳，大蛋白条带总是丢，marker的大条带偶尔也会丢，重新换了单体丙烯酰胺配胶，还是一样的问题
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智能温敏材料
1楼 2015-04-02 10:23:00
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lirol

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
会丢是什么意思？没有跑开吗，把胶的浓度做的低点试试吧，8%试试看~
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2楼2015-04-02 10:54:51
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fiseah

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lirol at 2015-04-02 10:54:51
会丢是什么意思？没有跑开吗，把胶的浓度做的低点试试吧，8%试试看~

跑的就是8%的胶  看了下APS 已经过期了 买了4年了 会不会是这个问题呀
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智能温敏材料
3楼2015-04-02 14:28:29
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lirol

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by fiseah at 2015-04-02 14:28:29
跑的就是8%的胶  看了下APS 已经过期了 买了4年了 会不会是这个问题呀...

表示用过过期的APS，木有出现什么问题呀，APS和TEMED都是促进丙烯酰胺凝固的，所以应该没有什么影响的；你如果担心是这个的问题可以做个control看一下~上样的时候用别人用过的样品做个对照哦~
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4楼2015-04-02 14:58:58
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fiseah

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lirol at 2015-04-02 14:58:58
表示用过过期的APS，木有出现什么问题呀，APS和TEMED都是促进丙烯酰胺凝固的，所以应该没有什么影响的；你如果担心是这个的问题可以做个control看一下~上样的时候用别人用过的样品做个对照哦~...

主要是胶上成片条带像是被吞噬的感觉，很诡异，丙烯酰胺单体也换过了，还是一样，不会是电泳槽的问题吧？
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智能温敏材料
5楼2015-04-02 18:17:34
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lirol

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
fiseah: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-04-03 11:27:27
引用回帖:
5楼: Originally posted by fiseah at 2015-04-02 18:17:34
主要是胶上成片条带像是被吞噬的感觉，很诡异，丙烯酰胺单体也换过了，还是一样，不会是电泳槽的问题吧？...

电泳槽不会出什么问题吧，不过要看看是不是把正负极弄反了~建议你该任何条件都做control，加一个不同批次的marker和实验室其他人的样品~
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6楼2015-04-03 08:55:04
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叶晓波1572

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

上样的时候有没有吸到管底一团的东西（细胞碎片）？如果有，可能是loadingbuffer 少了，样品裂解不够充分，点样吸入的细胞碎片影响跑胶。
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7楼2015-04-08 14:23:27
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fiseah

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 叶晓波1572 at 2015-04-08 14:23:27
上样的时候有没有吸到管底一团的东西（细胞碎片）？如果有，可能是loadingbuffer 少了，样品裂解不够充分，点样吸入的细胞碎片影响跑胶。

查看了下loadingbuffer，采用买来的问题解决了
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智能温敏材料
8楼2015-04-09 15:11:40
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