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qjoypark

银虫 (初入文坛)

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专业: 分子与进化生态学

[求助] 企鹅羽毛里的DNA提取问题

最近在做一个实验需要从企鹅羽毛里提DNA，我取了根部毛囊细胞和上面一点点硬的部分，液氮研磨以后试剂盒苯酚氯仿蛋白酶隔夜消化，PCR扩增CHD基因什么条带都看不到。问题如下：
1.这样是否一定是模版有问题，反应体系已经试过了梯度PCR 各种浓度的反应体系。均未见条带。扩增COI片段未见条带，是不是模版本身还是不行？
2.羽毛角质化的蛋白质用蛋白酶怎么消化不了？如果不行的话消化时加一点巯基乙醇是否可以？ DTT配制比较麻烦是否可以加DTT帮助消化角蛋白？两者哪个好用？

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1楼 2015-03-26 23:53:37

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