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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 有抗原蛋白提纯经验的吗？请进来交流一下。
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星空下仰望

新虫 (初入文坛)

[交流] 有抗原蛋白提纯经验的吗？请进来交流一下。 已有2人参与

先说一下情况：目前我在研究一种蘑菇。现在我用这种蘑菇作为一种抗原，注射小鼠。得到抗体，然后再进行单克隆抗体培养。已经得到了单克隆抗体。抗体这方面问题已经解决了。现在我想对蘑菇中哪种蛋白是抗原进行研究。问题就是：如何才能得到那种抗原蛋白？
   我先说说我的想法吧：毫无疑问，注射给小鼠的蘑菇中含有大量蛋白，里面肯定有我需要的抗原蛋白。我最先是用蛋白分离的方法，也就是电泳，看看能跑出多少条带，结果不好，因为技术条件原因，远远达不到纯正的抗原蛋白的条件。现在我有另外的想法：首先，抗原抗体会主动结合成复合物，我就打算先进行反应。然后想办法把抗原抗体复合物提取出来（我想用离心的方法，不知道可不可行）。然后在利用一种解离剂把抗原和抗体分开，再利用电泳或者离心把两种蛋白分开，离子层析也可以试试。最后就能得到纯的抗原蛋白了。
   我想问的问题：1.抗原抗体复合物的提纯，各位有什么好方法吗？我准备离心。2.有关于抗原抗体的解离剂的资料各位有吗？我没有找到免费的.3.两种蛋白的分离什么方法比较好，经济节约，不需要高端设备。
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1楼 2015-03-22 19:53:01
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星空下仰望

新虫 (初入文坛)
怎么没有人呢？
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2楼2015-03-23 14:04:20
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inabcd

铜虫 (初入文坛)
免疫共沉淀
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天行健，君子以自强不息！
3楼2015-03-23 15:49:00
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swlsangon

木虫 (小有名气)

快乐的木虫
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
首先进行WB检测，确定目的蛋白的大致分子量，然后查找文献关于这种蛋白的信息。
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生命在于运动
4楼2015-03-25 16:28:30
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