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xvbeihua

新虫 (初入文坛)

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虫号: 555186
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[交流] [SDS-PAGE中是否一定要加巯基乙醇][有效期至7月3日][求助完成]

我准备做SDS-PAGE凝胶电泳，没有任何经验。现在买试剂，但是巯基乙醇买不到，属于毒品。请问在样品溶解液中不加巯基乙醇是否可以，或者是否有其他试剂可以代替。我要分离的是一种小分子的多肽，分子量只有7，000到20，000
请高手指点，谢谢！

[ Last edited by zzgyb on 2008-7-15 at 16:56 ]

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1楼 2008-06-24 16:39:25

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liuyan001

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虫号: 577734

★ ★ ★
xvbeihua(金币+3,VIP+0):谢谢你的认真回答，我心里有底了。请与别人共享我的感谢。

当然能很好的分离呀,只要能调好凝胶成分即可.以下是我实验心得供你参考:
可以根据要分离物质分子的大小，选择合适的凝胶成分，使之既有适宜的空隙度，又有比较好的机械性质。一般说来，含丙烯酰胺7-7.5%的凝胶，机械性能适用于分离分子量范围不1万至100万物质，1万以下的蛋白质则采用含丙烯酰胺15-30%的凝胶，而分子量特别大的可采用含丙烯酰胺4%的凝胶，大孔胶易碎，小孔胶则难从管中取出，因此当丙烯酰胺的浓度增加时可以减少双含丙烯酰胺，以改进凝胶的机械性能。