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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 灰度分析
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逸悠然

铜虫 (小有名气)

[求助] 灰度分析 已有2人参与

蛋白进行灰度分析时，是不是表达量越大，颜色越深，然后灰度越小呢？？实在是转不过来了，求指导！！！！
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1楼 2015-03-20 16:48:07
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曼舞流苏

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 逸悠然 at 2015-03-23 13:53:38
哦哦，这样呀！！我用的是Photoshop，这个软件行吗？我再试试...

专业分析电泳条带的软件还是用Quantity one比较好，一般情况下我们只是用Photoshop来将倾斜的条带转动适当的角度，使之水平，然后保存成白色图片，剪裁成适当大小，然后用Quantity one来进行光密度值分析，这款专业软件里面有自动泳道识别、背景排除等等，还是比较专业和准确的。
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6楼2015-03-23 14:43:18
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是表达量越大，颜色越深，灰度值也越高，但是要判定一个蛋白是否高表达，还要选个内参作为对照，通过两者的灰度比值来看蛋白的表达量
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医学&统计学
2楼2015-03-22 17:40:44
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逸悠然

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 董博士 at 2015-03-22 17:40:44
应该是表达量越大，颜色越深，灰度值也越高，但是要判定一个蛋白是否高表达，还要选个内参作为对照，通过两者的灰度比值来看蛋白的表达量

非常感谢。我想问一下，我的实验结果，胶片上看起来颜色很深，为啥测得灰度值低呢？还有黑色的灰度值是零吗？这不是正好又反了吗？
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3楼2015-03-23 09:17:46
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曼舞流苏

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
逸悠然: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-03-23 13:53:52
目测楼主用Quantity one选择条带时候，背景设置是不是黑底白色条带？正常情况应该是白底黑色条带。这样灰度就是正常的啦，你去试试。。。
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4楼2015-03-23 11:05:41
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