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shushengqi520

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[交流] 求救··· 分子生物学

在破裂解法抽提质粒过程中使用的solutionⅠ Ⅱ Ⅲ有哪种溶液或者哪些成分可以省略？为什么？
有效期至08年6月25

[ Last edited by shushengqi520 on 2008-6-24 at 16:20 ]

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1楼 2008-06-24 10:37:24

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he_anzheng

铁杆木虫 (初入文坛)

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an答

★ ★ ★ ★ ★
shushengqi520(金币+5,VIP+0):xiie xie ni de hui da

去污剂 (如 SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20 等) 和盐 (如 Tris、EDTA、NaCl 等)是必不可少的
盐的作用，除了提供一个合适的裂解环境 (如 Tris)，还包括抑制样品中的核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏 (如 EDTA)、维持核酸结构的稳定 (如 NaCl) 等。去污剂则是通过使蛋白质变性，破坏膜结构及解开与核酸相连接的蛋白质，从而实现核酸游离在裂解体系中。裂解体系中还可能加入蛋白酶，利用蛋白酶将蛋白质消化成小的片段，促进核酸与蛋白质的分开，同时，也便于后面的纯化操作以及获得更纯的核酸。也有直接使用高浓度的蛋白质变性剂 (如 GIT、GuHCl 等) 裂解的，该方法已经成为了 RNA 抽提的主流，却不是基因组 DNA 抽提的主流