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[交流]
求助：顺铂衍生化的问题
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| 最近我试验不顺利，半个月前我开始用高效液相色谱法检测顺铂。由于其吸收较弱，我采用了柱前衍生化的方法，衍生化试剂选用的是DDTC（二乙基二硫代氨基甲酸钠），步骤如下：取0.1ml的顺铂药物（50ug/ml），加入0.2ml的生理盐水，20ul的氯化镍内标液（109ug/ml）和0.2ml 5%的DDTC溶液（DDTC用0.1mol/L的NaOH配制而成）。振荡。置于37度水浴中半小时，取出。加入0.4ml的氯仿提取，离心10000rpm/min，10分钟。取下层液体20ul进样。试验结果：在3.7分钟左右出了一个强吸收的峰，它旁边有个没完全分开的小峰，此外没有其他峰。期望的是看到内标峰（Ni(DDTC)2）和药物峰（Pt(DDTC)2）。感觉是衍生化出现了问题，重复了很多次，结果还是这样。希望得到大家的宝贵意见。 |
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