| 查看: 1690 | 回复: 7 | |||
| 【奖励】 本帖被评价5次，作者hyj8226增加金币 4 个 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[资源]
[有奖交流]HPLC使用注意事项及HPLC柱子使用经验之谈(一些不同的见解)
|
|||
|
HPLC使用注意事项 1.流动相必须用HPLC级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜 过滤)。 2.流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。 3.不能用纯乙腈作为流动相，这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。 4.使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时，然 后用甲醇(或甲醇水溶液)冲 洗40分钟以上，以充分洗去离子。对于柱塞杆 外部，做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。 5.长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水保存柱子，而应该用有机相(如甲醇等)，因为纯水易长霉。 6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。 7.C18柱绝对不能进蛋白样品，血样、生物样品。 8.堵塞导致压力太大，按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查 并清洗。清洗方法；①以异 丙醇作溶剂冲洗：②放在异丙醇中间用超声波清 洗；⑧用10％稀硝酸清洗。 9.气泡会致使压力不稳，重现性差，所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。 10.如果进液管内不进液体时，要使用注射器吸液：通常在输液前要进行流动相 的清洗。 11.要注意柱子的PH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。 12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗，然后插入新的 流动相中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。 本人觉得这个注意事项有些不妥的地方： 1.流动相最好是用高效液相色谱级的，但是色谱级的比较贵，考虑到成本在做一些高波段的检测时可以用分析级的甲醇或乙腈，但是需要过0.45um的膜。HPLC级的试剂可以不用过膜直接作为流动相使用。 2.流动相最好要进行脱气。最好的脱气方式是氦气脱气，其次是真空脱气，超声是最差的脱气方法，一般只能脱掉30%的气体。对高压梯度影响不大，低压梯度一定要接在线脱气机。 6.对进样器的清洗不能用缓冲盐溶液。 7.蛋白、血样和生物样品可能对C18柱进行污染，只要选择合适的流动相，对样品进行有效的前处理，还是可以使用C18柱对这些样品进行分析的，不过做样好要进行有效的清洗。 其他项较为合理。 [ Last edited by dnp on 2008-6-23 at 10:26 ] |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 有机化学 |
» 猜你喜欢
咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否
已经有21人回复
-
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有5人回复
-
国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率
已经有8人回复
-
各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。
已经有7人回复
-
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有48人回复
-
filecode
已经有10人回复
-
奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样
已经有11人回复
-
有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验）
已经有8人回复
-
应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键
已经有37人回复
-
好奇怪的filecode
已经有7人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
5楼2008-06-23 23:33:28
2楼2008-06-23 10:27:56
3楼2008-06-23 10:50:35
4楼2008-06-23 11:12:26
