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紫云英2012

铜虫 (初入文坛)

[求助] 测定植物中羧酸酯酶,加入显色剂后出现浑浊,求高手帮忙!

我在测定羧酸酯酶的时候,显色剂是用经典的固蓝B和十二烷基硫酸钠混合溶液【1%固蓝B盐溶液(0.1g固蓝B盐溶解在10mL高纯水中)和5%十二烷基硫酸钠溶液(1.25g十二烷基硫酸钠溶解在25mL高纯水中)以2:5(V:V)的比例混合】,当我往含有α-萘酚的溶液中加入显色剂的时候,溶液颜色迅速由紫红色变成暗紫色,同时感觉会出现浑浊,好像变成了乳浊液的样子,空白对照(没有加α-萘酚)也会出现浑浊现象。后来将反应液中的40mM磷酸缓冲液(pH7.0)换成高纯水就不会出现浑浊,难道是显色剂与磷酸缓冲液发生反应了?刚在论坛里看到有说固蓝B要用5%盐酸配,请高手指导一下究竟是哪里出问题了?
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xi0922

新虫 (初入文坛)

请问最后是如何处理的?我现在做羧酸酯酶的测定也是碰上了这样的问题
固蓝B盐溶液我如果按照文献用PBS配置就会有不溶的絮状沉淀,但是用纯水溶解则完全溶解
但是接下来将其作为显色剂进行下一步实验则会碰上和您一样的情况
等待并心怀希望吧
2楼2022-03-01 11:17:35
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