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xiaomuchong872

金虫 (小有名气)

[交流] PCR污染

今天做PCR
设了个阳性对照,未加DNA模板
居然出来跟目的带一般大小的条带,且灰度差异不大
请高手指点可能的原因
[search]PCR[/search]
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annwt

木虫 (正式写手)

PCR污染是个头疼的问题,我个人认为应该从以下几方面分析:第一是操作问题,技术的不熟练和操作的不规范经常由于误操作造成模板、酶、和药品的污染。第二是管理问题,大家共用一些药品和试剂,如果管理不到位,其他同学污染了药品是经常的事,第三是环境问题,大家经常忽略环境,认为空气是干净的,其实空气也是溶剂,里面会有DNA等各种分子和生物,虽然大家知道但经常忽视。由于PCR的放大作用,往往一小点失误就会造成意想不到的污染问题。问题往往暴露在理智与冷静面前,往往在微小的改进后就会获得成功。
14楼2008-07-10 17:01:55
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jerome711

银虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
换个引物看看,要产物大的。注意操作规范。
做懂得生活的人
2楼2008-06-22 15:21:31
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wyzl2007

金虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
引用回帖:
Originally posted by xiaomuchong872 at 2008-6-22 14:48:
今天做PCR
设了个阳性对照,未加DNA模板
居然出来跟目的带一般大小的条带,且灰度差异不大
请高手指点可能的原因
[search]PCR[/search]

一点儿不稀奇,PCR是一个放大信号的过程,你需要注意的是你的操作手法以及你所用的试剂
3楼2008-06-22 20:36:23
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glenn_007

木虫 (小有名气)


reasonspare(金币+1,VIP+0):积极交流奖
注意你的枪头~~
4楼2008-06-23 15:55:14
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