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背景 我的研究方向是慢病毒转染细胞,本人给出版社投稿后,出版社返回修改意见, 我的文章讨论部分原文如下:“ 对于转染效率的差异,笔者猜测可能 与以下因素有关 1)本实验中发现,转染效率与细胞状态关系密切,(2)细胞供体的年龄因素或可影响细胞活性。(3)实验用药物使用量的差异导致转染效果的差异。(4)同时,经不断摸索发现,在细胞培养至第二代时活性较佳,当细胞达到30%、60%、90%时,分别对细胞转染,来检测转染效率,发现细胞融合率达到60%时,转染效率最高。(5)在转染时间上,我们试验过12h、24h、48h、72h、84h的慢病毒转染,对于72h的转染时间较为满意。因为,在12h、24h及48h的转染试验中,只能见到极个别细胞合成绿色荧光蛋白。而84h的转染时间会导致细胞大量死亡。所以,选定以72h作为转染时间,既保证了转染后细胞的活力,又有较满意的转染效率。出版社答复:上述提及的“可能原因”必须找到相关文献支持。 个人见解:因我使用通过包含H基因的慢病毒进行转染,相关文献少之又少,pubmed上用H基因转染的文章也多用脂质体或噬菌体,而不是慢病毒。虽是转染,但使用的技术有微小差异, 请问:①请帮忙找一下涉及以上5条“可能因素”的相关文献或者文件名(自己实在查不到了。或者有外文版的转染手册也可,如果是手册,请注明在哪本论著中找到的,标明参考文献的时候要用)②如果文献支持实在查不到,是否有办法应对出版社的这种高难度的要求? 谢谢 |
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1)本实验中发现,转染效率与细胞状态关系密切,(2)细胞供体的年龄因素或可影响细胞活性。(3)实验用药物使用量的差异导致转染效果的差异。(4)同时,经不断摸索发现,在细胞培养至第二代时活性较佳,当细胞达到30%、60%、90%时,分别对细胞转染,来检测转染效率,发现细胞融合率达到60%时,转染效率最高。(5)在转染时间上,我们试验过12h、24h、48h、72h、84h的慢病毒转染,对于72h的转染时间较为满意。因为,在12h、24h及48h的转染试验中,只能见到极个别细胞合成绿色荧光蛋白。而84h的转染时间会导致细胞大量死亡。所以,选定以72h作为转染时间,既保证了转染后细胞的活力,又有较满意的转染效率。
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