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atonement

铁虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE 已有6人参与

求助：SDS-PAGE胶总是跑成八字形，怎么解决？

谢谢！
SDS-PAGE
IMG_20150211_143621.jpg
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1楼 2015-03-11 00:14:56
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

九字江山

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是凝胶配的不好，可能是凝胶聚合不均匀、有气泡、电渗流、胶底部有空隙等原因，导致电泳时电压与电流在凝胶中不均匀，换块凝胶试试看吧。再有就是缓冲溶液有些问题，导致电泳时电压与电流在凝胶中不均匀。
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4楼2015-03-11 09:40:27
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匿名

本帖仅楼主可见
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2楼2015-03-11 08:31:28
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胡程

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这怎么跑偏成这样，你跑的步骤发过来让大家看看，电压啥的影响很大
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做最好的自己
3楼2015-03-11 08:52:51
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atonement

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 九字江山 at 2015-03-11 09:40:27
应该是凝胶配的不好，可能是凝胶聚合不均匀、有气泡、电渗流、胶底部有空隙等原因，导致电泳时电压与电流在凝胶中不均匀，换块凝胶试试看吧。再有就是缓冲溶液有些问题，导致电泳时电压与电流在凝胶中不均匀。

已经重复做了几次了，缓冲液什么的也都重新配了，每次都跑偏。。
会不会是仪器的问题？
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5楼2015-03-11 09:45:06
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九字江山

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by atonement at 2015-03-11 09:45:06
已经重复做了几次了，缓冲液什么的也都重新配了，每次都跑偏。。
会不会是仪器的问题？...

如果你的试剂和操作都没问题的话，那就只有可能是你仪器的问题了，话说做蛋白表达时见过跑偏的，只是没见过跑的这么偏的额━┳━　━┳━
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6楼2015-03-11 10:12:15
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在下狒狒

新虫 (初入文坛)
可能和上样量也有一定的关系，上样前测一下蛋白质浓度，保证每孔上样蛋白质浓度不要差太远；
另外marker蛋白用的上扬缓冲液尽量和样品的上样缓冲液一样
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7楼2015-03-11 13:38:22
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小耗子大脾气

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我觉得主要是密封性不好，1可能是你的胶不均匀2电泳体系之间有缝隙，具体的还是要看你的操作步骤呀
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耐得住寂寞才能熬的到盛放
8楼2015-03-12 09:23:43
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annysupu

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶做的不好，可以适当调节一下比例，还有跑的时候电压电流控制的不好

[ 发自小木虫客户端 ]
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9楼2015-03-12 09:55:54
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曼舞流苏

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

确实木有见过跑的这么歪歪扭扭的，电压问题、凝胶配置问题（看看配方是不是又问题），弱弱的问一句，最低级的问题：你这是用聚丙烯酰胺凝胶还是琼脂糖跑的啊？
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10楼2015-03-17 17:17:30
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