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yizhanwei

金虫 (初入文坛)

[求助] [质粒的多少是否和选择标记浓度成正比]+[有效期至2008年6月30日]

请教大虾,
我们现在用的是基因工程菌,对菌 的背景却不是很了解,现在我们想知道菌是否有退化现象,既质粒脱落的情况,所以用梯度带标记的选择培养基分离菌液,从结果看,在可生存浓度下菌量是一样多,菌量并没有表现出梯度,而当标记物浓度达到很高时,所有菌都不能长出来了,因为我们并不知道这是否是它的致死浓度,请问这能说明菌是未退化吗

[ Last edited by yizhanwei on 2008-6-19 at 16:48 ]
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rtli1672

金虫 (著名写手)


yizhanwei(金币+1,VIP+0):谢谢,请问您是学什么的
应该不是退化。在一定范围内提高标记物浓度可以提高质粒保留的程度,菌的耐受力有限,一旦超过上限浓度,菌就无法生长。
2楼2008-06-19 17:11:13
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hljbhs

铁杆木虫 (著名写手)


yizhanwei(金币+1,VIP+0):如果能多介绍一下你认为可能整合的依据就好了,谢谢
http://www.bioon.com/experiment/mob/276652.shtml

一般来说是加甘油20%左右,-70保存;或制成干粉保存。但是在做甲醇酵母时发现了个问题,就是重组工程菌的退化现象比较严重,一般都是学生做得好好的,但是毕业以后下面的师弟一接手,蛋白就不表达了,或表达量非常的低。连续好几个师兄的结果都是如此,很是奇怪。我猜测可能是由于整合入基因组,毕竟是个外源的基因,不知整合到了染色体的什么部分,会不会过段时间就给“踢”下来,或就沉寂了?E.coli在复苏时都有抗性压着,酵母好像没有太合适的
****************
http://www.pet3000.com/bbs/viewt ... &extra=page%3D1

常见的菌种衰退现象有哪些?怎样区别菌种的退化和变异?
菌种的退化、变异较为复杂。常见的菌种衰退现象很多,如曲霉菌不生孢子或生孢子稀少,糖化力下降;酵母菌稍稳定一些,但也有变异。在什么情况下发生变异呢?一,菌种长期生活在不良的条件下,由于物理、化学、生物等因素的变化,特别是营养成分、温度、pH的变化,致使菌种变异衰退。如曲霉长期生活在高糖、高蛋白的培养基上,糖化能力衰退;高温酵母长期在低温状态下培养和保存,有可能失去耐高温的特性。二,菌种在不适于作为保藏的培养基上传代次数越多,菌种的自然变异就超大,以致某一特性逐渐降低。如3.4309唐花菌长期在营养丰富的米曲汁斜面上传种,则糖化力急剧下降。三,把野生菌种变成纯培养菌种,由于某些营养成份的缺乏,常常使某些子实体构造失去。如曲霉的子囊壳,镰刀霉的多细胞分生孢于等。四,试管菌种被污染,或培养基条件不适宜,菌株长不好,称为“菌种退化”。从遗传的观点看,菌种遗传是相对的,变异是绝对的,培菌工作的任务.就是要保持菌种的相对稳定性,使其朝着有益的方向变异。
小木虫优秀会员
3楼2008-06-19 22:35:15
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