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meiny

木虫 (职业作家)

[交流] 再生C18的一点疑问!

各位虫子们:
我的一根C18柱子需要再生,在网上查得方法为:“非极性固定相(如反相色谱填料RP-18,RP-8,CN等)的再生: 水→乙腈→氯仿(或异丙醇)→乙腈→水”,为了避免意外发生,我想把我心中得疑问问清楚点:
1,水应该是含有一定乙腈吧,有印象是不能用纯水冲C18得;
2,乙腈,氯仿和异丙醇是纯得吗?无需混入水吗?
3,我也曾看到先用氯仿在用异丙醇冲,这里好像就用一个冲洗就可以了,到底那个方式好啊!前者应该再生效果更好吧?体积用多少比较合适呢?我得柱子是250×4.0mm得!
4,有人推荐若是再生效果不好,用0。05M得硫酸冲洗可以效果很好,我想知道这也可用于C18吗?好像C18得适宜pH范围为2-8,若用上面得酸不会对柱子产生影响吗?

问题太多,先感谢虫虫们得关注!
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shirui518

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
dnp(金币+3,VIP+0):谢谢应助……^_^
再生的目的主要是恢复柱子的活性,
这就要从柱子柱效降低的原因来分析:
如果是用缓冲盐比较多,要用水冲,然后用已经或甲醇冲,
用氯仿等有机相的目的一是除去甲醇乙腈难以出去的有机物,还有用环己烷正己烷冲的,二是使得c18的链状结构恢复(如果大量用水相,c18链会缩成一个团,造成柱效降低)。
1、不是,可以直接用水,我们冲过不过只有25ml,不敢多用。
2、是的
3、最好都用,这就涉及到键合相如何键合的问题了,~~一般都是个25ml
4、浓度有点大,我们都是500ml的流动相,滴加1滴浓硝酸即可
2楼2008-06-19 16:29:08
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小老虎8688

1

使用正己烷或环己烷与甲醇等时需要用异丙醇进行过渡
3楼2008-06-20 07:44:34
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meiny

木虫 (职业作家)

感谢楼上的帮助!
4楼2008-06-20 09:18:25
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