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soloman1999

[交流] N-乙酰鸟氨酸转氨酶催化的显色反应 急!

反应过程为
N-乙酰谷氨酸-γ-半醛+谷氨酸→N-乙酰鸟氨酸+α-酮戊二酸(转氨酶)
0.5ml总反应体积
试剂
磷酸钾  ph8.0 50µmol
N-乙酰-L-鸟氨酸 1.5µmol
酮戊二酸钾 1.7µmol
5-磷酸吡哆醛 0.01µmol
步骤
以加入酶开始计时
37℃15分钟
终止反应时加入0.3ml  6 N盐酸
用铝箔盖住试管,废水加热30分钟
冷却至25 ℃,加入1ml 3.6M乙酸钠水溶液
和0.2mi 0.033M邻氨基苯甲酸
25 ℃放置15分钟,440mµ 1cm光路径测吸光值
酶单位以0.100个吸光值为1酶活单位
文献上说有黄色反应
请问显色的原理是什么?是什么起作用的?最后加入的邻氨基苯甲酸和乙酸钠起什么作用?
不胜感激!!!!
[search]N-乙酰鸟氨酸转氨[/search]
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soloman1999

不好意思啊!最后加入的是邻氨基苯甲醛
2楼2008-06-24 09:33:56
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