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soloman1999

[交流] 求助乙酰鸟氨酸转氨酶酶活测定方法

如题
我查到一篇文献测定方法如下,但是原理不懂,测不到酶活,请各位大虾帮帮忙啊!不胜感激!
0.5ml总反应体积
试剂
磷酸钾  ph8.0 50µmol
N-乙酰-L-鸟氨酸 1.5µmol
酮戊二酸钾 1.7µmol
5-磷酸吡哆醛 0.01µmol
步骤
以加入酶开始计时
37℃15分钟
终止反应时加入0.3ml  6 N盐酸
用铝箔盖住试管,废水加热30分钟
冷却至25 ℃,加入1ml 3.6M乙酸钠水溶液
和0.2mi 0.033M邻氨基苯甲酸
25 ℃放置15分钟,440mµ 1cm光路径测吸光值
酶单位以0.100个吸光值为1酶活单位
请注意此酶催化乙酰谷氨酸半醛到乙酰鸟氨酸的反应,为什么反应体系中加入了产物?原理是什么,整个反应与显色的原理和应注意的地方是什么?如果哪位高人有其他方法,也请告诉我一下!
email:zxshengwu@126.com
[search]酶活测定[/search]
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soloman1999

不好意思啊!最后加入的是邻氨基苯甲醛
2楼2008-06-24 09:34:26
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