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skkyy88888

铜虫 (著名写手)

[交流] 凝血实验中血液的处理

2%的红细胞悬液的制备:取新鲜血液10ml.加抗凝剂(柠檬酸钠)1g,用0.85%的生理盐水反复洗涤5次,每次2000r/min离心5min,去上清,按红细胞压积用生理盐水配置成2%的红细胞悬液.

以上是文献中描述的,我有两点不明白,请高手指点,一,用生理盐水洗涤的时候该用多少体积? 二.红细胞压积是如何判断的.
总之看完后我不知道如何配.请大家帮忙,谢谢.
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cj910

铜虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★
lixiaoyi1981(金币+4,VIP+0):呵呵,就冲你的热心和个人经验分享,不得不鼓励一下。
我做的时候生理盐水是没限定多少体积,你这样的情况10ML也就可以了;至于红细胞压积是:血液经抗凝处理后,通过离心可以把血液分为两大部分,血浆和血细胞。如果将血液放在一个特殊的试管中(温氏管)按规定的时间和速度进行离心,最终使得红细胞完全压实在试管的底端,红细胞之间互相接触密切,尽可能排除所有血浆,此时血浆会全部被挤出到血细胞的上面,这时红细胞所占全血的百分比就是我们所要得到的红细胞压积,即压实的红细胞所占的体积数(或百分比),也叫红细胞比积或红细胞比容。
2楼2008-06-17 11:44:57
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by cj910 at 2008-6-17 11:44:
我做的时候生理盐水是没限定多少体积,你这样的情况10ML也就可以了;至于红细胞压积是:血液经抗凝处理后,通过离心可以把血液分为两大部分,血浆和血细胞。如果将血液放在一个特殊的试管中(温氏管)按规定的时间和 ...

有具体的操作步骤吗?5金币答谢.
3楼2008-06-17 17:48:07
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cj910

铜虫 (初入文坛)

我当时是用来做HA试验用的,采的是豚鼠血;我把血液分到15ML大的离心管里,先将血液按1:1的比例加生理盐水,以1500r/min离心10min,吸去上清;重复上述步骤3次即可(重复步骤加的生理盐水以不超过12ML的刻度)。以上操作均需小心,稍微轻轻吹打下洗涤红细胞就行。我是这么操作的,希望对你有帮助。

[ Last edited by cj910 on 2008-6-17 at 18:57 ]
4楼2008-06-17 18:56:18
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