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wuqicheng123

木虫 (正式写手)

[交流] HPLC问题

请问 在HPLC使用时

什么情况下需要缓冲溶液?又应该怎么选择PH呢?
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corrinejiang

金虫 (正式写手)


xy4585618(金币+1,VIP+0):谢谢应助
看具体情况啊,有的时候峰型不好,可以用缓冲盐,ph与你的化合物有关,要在pka附近,这样才能保证离子型和分子型的平衡,保留行为才好,实在不行,就试试,在柱子允许的范围内多试几个ph,然后再慢慢选。楼主千万要记得,用缓冲盐的时候千万要过渡,用同比例的有机相和水相过渡半小时,用前和冲柱前都过渡,否则就容易析出结晶,尤其是磷酸盐。
2楼2008-06-16 16:38:08
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xy4585618

荣誉版主 (著名写手)

小木虫

引用回帖:
Originally posted by wuqicheng123 at 2008-6-16 12:41:
请问 在HPLC使用时

什么情况下需要缓冲溶液?又应该怎么选择PH呢?

主要是根据你检测的成分有关系
是也罢,非也罢,是是非非争个啥。河东河西三十年,对的错啦,错的对拉!得也罢,失也罢,患得患失误年华。凡事该做尽管做,得了更好,失也没啥!
3楼2008-06-16 16:42:37
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zby888

金虫 (正式写手)

天涯养生网:http://www.tyys


karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢指点!
问题是看你先用正相还是反向色谱条件。
1、正相色谱法采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与腈基键合相);流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷),常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等)。
2、反向色谱法一般用非极性固定相(如C18、C8);流动相为水或缓冲液,常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。适用于分离非极性和极性较弱的化合物。RPC在现代液相色谱中应用最为广泛,据统计,它占整个HPLC应用的80%左右。为控制样品在分析过程的解离,常用缓冲液控制流动相的pH值。但需要注意的是,C18和C8使用的pH值通常为2.5~7.5(2~8),太高的pH值会使硅胶溶解,太低的pH值会使键合的烷基脱落。
天涯养生网:http://www.tyysw.net
4楼2008-06-16 19:49:53
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lanmao_620

铁虫 (初入文坛)

请楼上的正相色谱有用缓冲盐的例子吗?
5楼2008-06-17 09:30:01
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