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wuqicheng123木虫 (正式写手)
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HPLC问题
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请问 在HPLC使用时 什么情况下需要缓冲溶液？又应该怎么选择PH呢? |
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2楼2008-06-16 16:38:08
xy4585618
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karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢指点！
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问题是看你先用正相还是反向色谱条件。 1、正相色谱法采用极性固定相（如聚乙二醇、氨基与腈基键合相）；流动相为相对非极性的疏水性溶剂（烷烃类如正已烷、环已烷），常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较强的化合物（如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等）。 2、反向色谱法一般用非极性固定相（如C18、C8）；流动相为水或缓冲液，常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。适用于分离非极性和极性较弱的化合物。RPC在现代液相色谱中应用最为广泛，据统计，它占整个HPLC应用的80%左右。为控制样品在分析过程的解离，常用缓冲液控制流动相的pH值。但需要注意的是，C18和C8使用的pH值通常为2.5~7.5（2~8），太高的pH值会使硅胶溶解，太低的pH值会使键合的烷基脱落。 |
4楼2008-06-16 19:49:53
5楼2008-06-17 09:30:01