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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » EMSA/ChIP » 5’生物素修饰DNA与3‘生物素修饰DNA有什么区别？
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modernsnake

银虫 (正式写手)

[求助] 5’生物素修饰DNA与3‘生物素修饰DNA有什么区别？ 已有2人参与

我想在34bp的双链DNA上面修饰生物素，目的是与链霉亲和素结合反应，请问5’端生物素修饰DNA与3‘端生物素修饰DNA有什么区别？生工都可以提供，另外我需要在双链DNA上修饰生物素，请问对修饰末端有没有什么要求？例如：需要粘性末端？非常感谢！
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1楼 2015-02-26 16:09:15
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w26150665w

铜虫 (正式写手)
★ ★ ★
modernsnake(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-02-28 22:21:10
生物素修饰的寡核苷酸能紧紧的结合在链霉亲和素蛋白上，链霉亲和素可以标记上荧光染料和酶或是附着的中间结合物附着在固体物生物表面，不同的分子生物学和纯化方法都包含生物素修饰。生物素修饰可以利用C6或是TEG间臂被添加在寡核苷酸的5’ 或 末端，-生物素TEG需要纯化，中间的生物素修饰可以通过dT碱基加入，这种形式需要更多的纯化步骤。引物生物素标记，可用于非放射性免疫分析来检测蛋白质、胞内化学染色、细胞分离、核酸分离、杂交检测特异性的DNA/RNA序列、离子通道构象变化等。

引物修饰啊，看效果的吧
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多多交流学习
2楼2015-02-27 09:24:02
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
除非你要拿来做酶催化反应，或者研究蛋白结合能力，一般情况下没区别
哪个便宜买哪个
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2015-02-28 06:55:46
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oO晶锅Oo

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
单链DNA杂交从3‘端开始，因此3’端的修饰易导致错配或杂交速率减慢，5‘端的修饰对杂交影响可忽略。
赞一下(5人) 回复此楼
4楼2015-02-28 10:36:30
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daxulalala

新虫 (初入文坛)
楼主是否可以提供联系方式，小弟的实验和你很相似，想与你交流一下
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5楼2016-04-03 11:32:00
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z631535213

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by daxulalala at 2016-04-03 11:32:00
楼主是否可以提供联系方式，小弟的实验和你很相似，想与你交流一下

同求交流

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6楼2016-05-06 00:05:12
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