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Frank2007198

铜虫 (小有名气)

[交流] 为什么PCR条带很淡,有什么办法变亮?谢谢

本人的PCR反应阳性对照和待测标本跑出来都很淡。
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silviasj

金虫 (著名写手)

★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
一,可以增大循环数。
二,多P几管,加样孔里多加点,以提高目的基因的浓度。
2楼2008-06-13 21:04:37
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zhjcao

木虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极交流奖
也可以以PCR产物为模板扩增,
3楼2008-06-13 22:20:42
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superwheat

银虫 (正式写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极交流奖
分子量对吗?
如果对的话,可以试试看降低退火温度,延长延伸时间,增加循环数之类的。

不过你说的条件太少了,可能性很多的。
4楼2008-06-14 01:39:07
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hqhe

木虫 (正式写手)


reasonspare(金币+1,VIP+0):代谢
可以考虑引物设计的问题
引物的特异性也许不够高
提高退火温度试一试
5楼2008-06-14 11:38:43
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superwheat

银虫 (正式写手)


reasonspare(金币+1,VIP+0):代谢
我觉得如果是很多杂带,特异性不足的话,才需要提高退货温度,如果没有杂带,且本身目标条带也很暗淡,那还是应该降低退货温度的。
6楼2008-06-14 13:48:40
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xiaoli8609

银虫 (小有名气)


reasonspare(金币+1,VIP+0):代谢
可能还是条件的问题,建议降低退火温度,增加循环数,也可以用产物再做模板,这样会更亮,还有可能就是你的模板质量不好。
7楼2008-06-15 13:00:05
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