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Frank2007198

铜虫 (小有名气)

[交流] 为什么PCR条带很淡，有什么办法变亮？谢谢

本人的PCR反应阳性对照和待测标本跑出来都很淡。
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1楼 2008-06-13 20:41:25
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silviasj

金虫 (著名写手)
★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):谢谢分享，欢迎常来
一，可以增大循环数。
二，多P几管，加样孔里多加点，以提高目的基因的浓度。
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2楼2008-06-13 21:04:37
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zhjcao

木虫 (小有名气)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极交流奖
也可以以PCR产物为模板扩增，
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3楼2008-06-13 22:20:42
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superwheat

银虫 (正式写手)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极交流奖
分子量对吗？
如果对的话，可以试试看降低退火温度，延长延伸时间，增加循环数之类的。

不过你说的条件太少了，可能性很多的。
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4楼2008-06-14 01:39:07
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hqhe

木虫 (正式写手)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):代谢
可以考虑引物设计的问题
引物的特异性也许不够高
提高退火温度试一试
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5楼2008-06-14 11:38:43
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superwheat

银虫 (正式写手)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):代谢
我觉得如果是很多杂带，特异性不足的话，才需要提高退货温度，如果没有杂带，且本身目标条带也很暗淡，那还是应该降低退货温度的。
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6楼2008-06-14 13:48:40
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xiaoli8609

银虫 (小有名气)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):代谢
可能还是条件的问题，建议降低退火温度，增加循环数，也可以用产物再做模板，这样会更亮，还有可能就是你的模板质量不好。
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7楼2008-06-15 13:00:05
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