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求大神解答Northern Blotting图中拖尾原因及解决方案
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前几次做Northern Blotting，用Roche的地高辛标记，曝光出来的总有拖尾，图示，是用原核生物16S探针做的，杂交时间大概16h。请问拖尾原因是什么呢？RNA 转膜前检测了没有明显降解，会不会转膜过程中出现了降解呢，转膜用的是电转仪转的试剂什么的都是DEPC处理过的，20V，40-50min左右。另外会不会是因为探针加太多?或者杂交时间太长？或者洗的不够？图中应该不会是非特异结合吧？ IMG_20150204_144634.jpg |
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2楼2015-02-06 09:34:29
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