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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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clf0803

银虫 (正式写手)

[交流] 如何改变条件使PCR产物浓度升高?

我的PCR目标产物电泳上条带很浅,应该如何改变PCR条件使目标产物浓度升高?谢谢!
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yangym1123

木虫 (小有名气)

如果有内部引物,使用Nested PCR试一下呢?
或者增加摸板浓度,增加循环数、换一种酶
2楼2008-06-10 17:21:05
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ice-2008

金虫 (小有名气)

增大模板浓度;如果没有非特异条带的话可以适当降低退火温度;也可以试着用PCR产物或者回收片段进行二次PCR
3楼2008-06-16 06:58:56
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seahow

木虫 (著名写手)

你首先应该 优化Tm;如有必要,第二步优化Mg例子浓度,条件好了,感觉条带还浅,你就稍微增点模板。呵呵。
4楼2008-06-16 07:15:53
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Frank2007198

铜虫 (小有名气)

楼主的情况我也遇到过,用Nested PCR太麻烦,可以将产物稀释1000倍做模板,或者采用楼上的方法。
5楼2008-06-16 10:58:24
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