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常用溶液配方
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LB液体培养基：baco-tryptone 10g bacto-yeast extract 5g NaCl 10g 搅拌完全溶解，用氢氧化钠10M调pH7.0，定溶1L，灭菌。 LB固体培养基：LB液体培养基临高压灭菌前加入15g琼脂。 氨苄青霉素：贮存液50mg/ml（水）， 过滤除菌，避光保存-20oC，用时取50微升加入50毫升培养基。 0.5M EDTA（pH8.0）：160毫升h2O+ EDTA-Na-2h2O（37.22g），磁力搅拌，用氢氧化钠（约4克颗粒）调pH8.0，定溶至200ml。分装高压灭菌。 1M Tris.HCl（pH 8.0）：160毫升h2O+24.22g Tris碱，加入浓HCl 8.4毫升后冷却至室温，调pH8.0，定溶至200ml。分装高压灭菌。 1.5M Tris.HCl（pH 8.8）：160毫升h2O+36.33g Tris碱，加入浓HCl ？毫升后冷却至室温，调pH8.8，定溶至200ml。分装高压灭菌。 1M Tris.HCl（pH 6.8）：160毫升h2O+24.22g Tris碱，加入浓HCl ？毫升后冷却至室温，调pH6.8，定溶至200ml。分装高压灭菌。 10%SDS：90毫升h2O溶解10gSDS（加热68oC助溶），加入几滴浓HCl调pH7.2，定溶至100ml，分装无须灭菌 提取质粒溶液1：200毫升 无水葡萄糖1.8 g 1M Tris.HCl（pH 8.0） 5ml 0.5M EDTA（pH 8.0） 4ml 定溶至200ml，灭菌，4oC保存 提取质粒溶液2（现用现配）： 10%SDS 1ml 10M NaOH 200 微升 水 8.8 ml 提取质粒溶液3：200毫升 KAc 58.884 g 冰乙酸 23 ml 定溶至200ml，灭菌，4oC保存 TE：1M Tris.HCl（PH8.0） 1ml（灭菌） 0.5M EDTA（PH8.0）200 微升（灭菌） 定溶100ml IPTG：8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后定溶至10ml，0.22um滤器过滤除菌，分装，-20 oC保存。 X-gal：用二甲基甲酰胺溶解X-gal配制成20mg/ml的贮存液，保存时防光破坏，-20 oC保存，无须过滤除菌。 氨苄青霉素（Amp母液）：50mg/ml。终浓度：50ug/ml。 3M NaAc（pH5.2）：50毫升h2O+24.61g无水NaAc或20.405g NaAc-3 h2O，冰乙酸调pH5.2，定溶至100ml。分装高压灭菌。 3M NaAc（pH7.0）：50毫升h2O+24.61g无水NaAc或20.405g NaAc-3 h2O，稀乙酸调pH7.0，定溶至100ml。分装高压灭菌。 2 X SDS凝胶加样缓冲液*：50ml（1M DTT：用20ml 0.01M的NaAc（PH5.2）溶解3.09gDTT，过滤除菌分装-20 oC保存），含DTT的溶液不宜高压处理。 1M Tris.HCl（PH6.8）5ml 0.1g 溴酚蓝 10g 甘油 10%SDS 20ml 1M DTT 10ml 加水 5ml 不含DTT的2 X SDS凝胶加样缓冲液可室温保存，临用前加入。 50XTAE；24.2g Tris 5.71ml冰乙酸 10ml 0.5M EDTA（pH8.0） 定溶100ml。 10XPBS：500ml 400ml蒸馏水+40gNaCl+1gKCl+7.2gNa2HPO4（或者18.14gNa2HPO412 h2O）+1.2gKH2PO4，用HCl调pH7.2，定溶，灭菌，室温保存。 凝胶加样缓冲液：0.25％溴酚蓝＋0.25％二甲苯青FF＋40％（w/v）蔗糖水溶液【或者30％甘油水溶液】 |
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