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weizhi111至尊木虫 (正式写手)
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trizol提取RNA时沉淀时醋酸钠加多了有什么后果 已有1人参与
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| 今天提取到最后一步沉淀时醋酸钠多加了一倍（算错了），还加了糖原助沉，结果发现里面很多白色的较大块的东西（不像是平时的RNA形成的絮状沉淀），不知道是什么东西，会对RNA产生什么影响？ |
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2楼2015-02-02 13:10:05
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【答案】应助回帖
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-02-02 21:09:27
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-02-02 21:09:27
| 如果量太多，应考虑是否会有糖原析出？http://muchong.com/html/201108/3476810.html |
3楼2015-02-02 13:11:27
weizhi111
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6楼2015-02-02 16:17:01
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如下内容是网上帮你搜到的，希望有用。 在去除多糖的同时RNA也被裹携走了，造成RNA产量的减少；而在沉淀RNA时，也产生多糖的凝胶状沉淀，这种含有多糖的RNA沉淀难溶于水，或溶解后产生粘稠状的溶液。由于多糖可以抑制许多酶的活性，因此污染了多糖的RNA样品无法用于进一步的分子生物学研究。在常规的方法中，通过SDS-盐酸胍处理可以部分去除一些多糖；在高浓度Na+或K+离子存在条件下，通过苯酚、氯仿抽提可以除去一些多糖；通过LiCl沉淀RNA也可以将部分多糖留在上清液中。但即使通过这些步骤仍会发现有相当多的多糖与RNA混杂在一起，所以还需要用更有效的方法来解决植物RNA分离纯化时多糖污染的问题。用低浓度乙醇沉淀多糖是一个去除多糖效果较好的方法。在RNA提取液或溶液中缓慢加入无水乙醇至终浓度10％～30％，可以使多糖沉淀下来，而RNA仍保留于溶液中。 |
7楼2015-02-03 13:31:57