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aircity

银虫 (初入文坛)

[交流] HE染色,苏丹三染色等实验步骤?

HE染色,苏丹三染色的实验步骤
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whycnq

木虫 (小有名气)

★ ★ ★
aircity(金币+3,VIP+0):很详细,谢谢!
1.石蜡切片HE染色(常规HE染色)
(1)二甲苯Ⅰ 5~10min
(2)二甲苯Ⅱ 5~10min
(3)无水乙醇Ⅰ 1~3min
(4)无水乙醇Ⅱ 1~3min
(5)95%乙醇Ⅰ 1~3min
(6)95%乙醇Ⅱ 1~3min
(7)80%乙醇 1min
(8)蒸馏水 1min
(9)苏木素液染色 5~10min
(10)流水洗去苏木素液 1min
(11)1%盐酸-乙醇 1~3s
(12)稍水洗 1~2s
(13)返蓝(用温水或1%氨水等) 5~10s
(14)流水冲洗 1~2min
(15)蒸馏水洗 1~2min
(16)0.5%伊红液染色 1~3min
(17)蒸馏水稍洗 1~2s
(18)80%乙醇 1~2s
(19)95%乙醇Ⅰ 2~3min
(20)95%乙醇Ⅱ 2~3min
(21)无水乙醇Ⅰ 3~5min
(22)无水乙醇Ⅱ 3~5min
(23)石炭酸-二甲苯 3~5min
(24)二甲苯Ⅰ 3~5min
(25)二甲苯Ⅱ 3~5min
(26)二甲苯Ⅲ 3~5min
(27)中性树胶封固
注:①(12)和(13)项可省去,但(14)的冲水时间需延长至10~15min(细胞核显示更清晰)。
②(23)项可用无水乙醇代替;北方地区可省略。


2.苏丹Ⅲ(SudanⅢ)染法
此法为最通用的脂肪染色法,对各种组织均适用。
(1)固定于10%甲醛的组织。
(2)采用冰冻切片。
(3)经蒸馏水洗后,浸染于Harris苏木素或明矾苏木素中1--2分钟。
(4)自来水冲洗,如核的染色过深,可用1%盐酸酒精分化。
(5)水洗后,移入70%酒精5秒钟。
(6)投入苏丹Ⅲ染色液中约30分钟或更长时间,置于56℃暖箱内。
(7)在70%酒精中洗涤5--10秒钟。
(8)洗于蒸馏水中,然后将切片移于玻片。
(9)切片以甘油明胶封固。
结果:脂肪呈橙红色,胆脂素且淡红色,脂肪酸不染色,胞核呈蓝色。
2楼2008-06-09 12:36:39
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