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HE染色,苏丹三染色等实验步骤?
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HE染色,苏丹三染色的实验步骤 ? |
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aircity(金币+3,VIP+0):很详细,谢谢!
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1.石蜡切片HE染色(常规HE染色) (1)二甲苯Ⅰ 5~10min (2)二甲苯Ⅱ 5~10min (3)无水乙醇Ⅰ 1~3min (4)无水乙醇Ⅱ 1~3min (5)95%乙醇Ⅰ 1~3min (6)95%乙醇Ⅱ 1~3min (7)80%乙醇 1min (8)蒸馏水 1min (9)苏木素液染色 5~10min (10)流水洗去苏木素液 1min (11)1%盐酸-乙醇 1~3s (12)稍水洗 1~2s (13)返蓝(用温水或1%氨水等) 5~10s (14)流水冲洗 1~2min (15)蒸馏水洗 1~2min (16)0.5%伊红液染色 1~3min (17)蒸馏水稍洗 1~2s (18)80%乙醇 1~2s (19)95%乙醇Ⅰ 2~3min (20)95%乙醇Ⅱ 2~3min (21)无水乙醇Ⅰ 3~5min (22)无水乙醇Ⅱ 3~5min (23)石炭酸-二甲苯 3~5min (24)二甲苯Ⅰ 3~5min (25)二甲苯Ⅱ 3~5min (26)二甲苯Ⅲ 3~5min (27)中性树胶封固 注:①(12)和(13)项可省去,但(14)的冲水时间需延长至10~15min(细胞核显示更清晰)。 ②(23)项可用无水乙醇代替;北方地区可省略。 2.苏丹Ⅲ(SudanⅢ)染法 此法为最通用的脂肪染色法,对各种组织均适用。 (1)固定于10%甲醛的组织。 (2)采用冰冻切片。 (3)经蒸馏水洗后,浸染于Harris苏木素或明矾苏木素中1--2分钟。 (4)自来水冲洗,如核的染色过深,可用1%盐酸酒精分化。 (5)水洗后,移入70%酒精5秒钟。 (6)投入苏丹Ⅲ染色液中约30分钟或更长时间,置于56℃暖箱内。 (7)在70%酒精中洗涤5--10秒钟。 (8)洗于蒸馏水中,然后将切片移于玻片。 (9)切片以甘油明胶封固。 结果:脂肪呈橙红色,胆脂素且淡红色,脂肪酸不染色,胞核呈蓝色。 |
2楼2008-06-09 12:36:39












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