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菜菜的夏子

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

有可能是封闭效果不好的原因,建议更换BSA或Casein-Na封闭试试。
11楼2015-03-16 16:18:27
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BoaHancock

金虫 (小有名气)

刺史

【答案】应助回帖

看着就是一个普通法的过程。  二抗稀释大一些1:5000, 包被浓度减小。  反应半小时也长了点,15分钟够了。
这个写点啥呢
12楼2015-03-17 08:52:32
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BoaHancock

金虫 (小有名气)

刺史

引用回帖:
12楼: Originally posted by BoaHancock at 2015-03-17 08:52:32
看着就是一个普通法的过程。  二抗稀释大一些1:5000, 包被浓度减小。  反应半小时也长了点,15分钟够了。

楼上还提到一个封闭问题,你可以做个封闭与未封闭的对比,BSA质量不好也影响封闭效果。
这个写点啥呢
13楼2015-03-17 08:54:12
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龙腾东方AC

新虫 (初入文坛)

根据我的经验,应该是二抗浓度太高且显色时间太长,我用的1:5000,显色5min,样品孵育时间也可以缩短一点,1h足矣。显色时候注意下,只要样品低浓度区出现蓝色即可终止了,不必按部就班的非得显色多长时间,根据现象灵活一点。
14楼2015-09-23 09:19:34
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