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铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

有可能是封闭效果不好的原因，建议更换BSA或Casein-Na封闭试试。

11楼2015-03-16 16:18:27

金虫 (小有名气)

刺史

看着就是一个普通法的过程。二抗稀释大一些1：5000，包被浓度减小。反应半小时也长了点，15分钟够了。

这个写点啥呢

12楼2015-03-17 08:52:32

金虫 (小有名气)

刺史

引用回帖:

12楼: Originally posted by BoaHancock at 2015-03-17 08:52:32
看着就是一个普通法的过程。二抗稀释大一些1：5000，包被浓度减小。反应半小时也长了点，15分钟够了。

楼上还提到一个封闭问题，你可以做个封闭与未封闭的对比，BSA质量不好也影响封闭效果。

这个写点啥呢

13楼2015-03-17 08:54:12

新虫 (初入文坛)

根据我的经验，应该是二抗浓度太高且显色时间太长，我用的1:5000，显色5min，样品孵育时间也可以缩短一点，1h足矣。显色时候注意下，只要样品低浓度区出现蓝色即可终止了，不必按部就班的非得显色多长时间，根据现象灵活一点。

14楼2015-09-23 09:19:34

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