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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

[交流] 请问DH5a能够用来表达吗?

一般的原核表达都是在PET-30a等载体上完成,并在BL21等专门的表达菌株总进行。

请问用来做质粒克隆的DH5a能够进行原核表达吗?如果加上信号肽,所表达的蛋白能够分泌到培养基中吗?疑惑中。。。
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guohuayin

木虫 (著名写手)

博士,副教授

★ ★
sxdxrhyy(金币+2,VIP+0):鼓励!
DH5a是用于克隆的菌株,不是用于原核表达的菌株,因为这个菌株不是DE3菌株,所以你加入T7启动子后是没法诱导基因表达的,我们一般情况下都是用T7启动子诱导外源基因表达的。
内生菌资源和核酸分子的利用
2楼2008-06-07 23:24:28
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hyf9901

铁杆木虫 (著名写手)

不行的,我试过的,哈哈
滴自己的汗,吃自己的饭,自己的事情自己办,不抱怨,不诉苦,走一步,是一步,一路朝前不回头,死到哪站算哪站
3楼2008-06-08 21:21:45
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wwicy

木虫 (正式写手)

就是不行的!
4楼2008-06-08 21:45:45
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

如果不用T7启动子呢?用别的细菌启动子不需要诱导的也不行吗?那为什么象那些氨苄啊什么的抗生素就可以比较呢?
5楼2008-06-10 19:52:26
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biogefart

木虫 (著名写手)

不是绝对的

如果你是lac或者tac等启动子,或者基因有自己的启动子都是可以表达的。
闹太套
6楼2008-06-11 09:31:27
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zyk_527

银虫 (小有名气)

还有如果是温度诱导的质粒如PBV220,DH5a还是首选的表达宿主呢
7楼2008-06-13 09:56:46
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