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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 植物生理研究中的蛋白免疫印迹
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logowang

铜虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-01-28 22:10:20
引用回帖:
6楼: Originally posted by xujingyuanxu at 2015-01-28 09:55:56
我是药学的，对植物生理这方面不是很了解，最近看这方面的文献有些费力还望指点：图片RbohD中的上标S39A等是代表什么意思呢？还有下面的分组L2，L3也分别单表什么意思呢？
文章标题The FLS2-Associated Kinase BI ...

s39a  或者 s343a 可能是点突变， 具体需要你看看文章中怎么说了。对于l1 l2 l3不是特别理解， 但感觉不一定是 第几代， 因为出现了l5  ， 一般情况不会利用第五代转基因植物的，看起来更像是不同的treatment， 很抱歉没办法花时间去读你的文章，不过相信你能弄明白的。
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11楼2015-01-28 18:30:38
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xujingyuanxu

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by logowang at 2015-01-28 18:30:38
s39a  或者 s343a 可能是点突变， 具体需要你看看文章中怎么说了。对于l1 l2 l3不是特别理解， 但感觉不一定是 第几代， 因为出现了l5  ， 一般情况不会利用第五代转基因植物的，看起来更像是不同的treatment， 很 ...

谢谢帮忙
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我努力，我坚持，我成功！
12楼2015-01-28 20:59:04
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a173968976

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 七夕小巫 at 2015-01-28 14:03:35
如果选择抗体比较麻烦，可以考虑用目标蛋白质组的技术去检测磷酸化，定量和定性都方便。 MRM技术 被认为是基于质谱的ELISA技术，非常适合这种实验。你要感兴趣做可以站内联系给我。

你好，我现在在做小热休克蛋白磷酸化的测定，但是它在植物里的表达量很少，做western blot 的时候最后的条带很浅很细，几乎看不清，想问有什么办法可以解决呢？
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13楼2015-05-06 17:54:10
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xujingyuanxu

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by a173968976 at 2015-05-06 17:54:10
你好，我现在在做小热休克蛋白磷酸化的测定，但是它在植物里的表达量很少，做western blot 的时候最后的条带很浅很细，几乎看不清，想问有什么办法可以解决呢？...

你好，我想问一下你们拿植物蛋白做western时所用的一抗和二抗是怎么得到的啊，因为动物实验里面都用现成的可以买，而植物的很少听说，你们的是定制的么？还是说拟南芥的蛋白也有相应的抗体出售呢？
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我努力，我坚持，我成功！
14楼2015-05-07 08:32:24
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七夕小巫

金虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by a173968976 at 2015-05-06 17:54:10
你好，我现在在做小热休克蛋白磷酸化的测定，但是它在植物里的表达量很少，做western blot 的时候最后的条带很浅很细，几乎看不清，想问有什么办法可以解决呢？...

做磷酸化蛋白western的话只能提高表达量吧，磷酸化肽可以通过富集以后送质谱检测到

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15楼2015-05-07 13:37:20
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1125科研王子

银虫 (初入文坛)
我也是做这个啊，最近在研究用什么抗体。纠结的要死啊。动物抗体能抗植物蛋白吗？
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德玛西亚！
16楼2015-11-09 16:06:41
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xujingyuanxu

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 1125科研王子 at 2015-11-09 16:06:41
我也是做这个啊，最近在研究用什么抗体。纠结的要死啊。动物抗体能抗植物蛋白吗？

据说二抗通用，一抗不行。。。。你是做哪方面的啊？
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17楼2015-11-09 21:49:48
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