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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » HPLC测定遇到问题——求助
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liyuan_scu

[交流] HPLC测定遇到问题——求助

大家好！
我现在在用HPLC测定呕吐毒素（检测波长是200nm）遇到一些疑问：
我查了文献，流动相可以用甲醇/水（30/70）和乙腈/水（10/90），我都做了，但是所得的峰面积比较小，1mg/L大概有5000，比起文献中的结果差了很远。请问这是什么原因？怎么样才能提高测定这种物质的灵敏度呢？
[search]HPLC[/search]
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1楼 2008-06-05 23:25:21
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qpdiao

银虫 (正式写手)
★ ★
dnp(金币+2,VIP+0):谢谢
我觉得这个样品的检测灵敏度主要是由样品本身和仪器的性能决定的，要想提高灵敏度，应该改变检测波长或者改变监测器，要么对样品进行衍生。
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2楼2008-06-06 09:17:22
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Doww

★
dnp(金币+1,VIP+0):欢迎木虫院士到分析灌水，谢谢应助……
不同仪器，没有可比性。
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3楼2008-06-06 09:33:04
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liyuan_scu

引用回帖:
Originally posted by qpdiao at 2008-6-6 09:17:
我觉得这个样品的检测灵敏度主要是由样品本身和仪器的性能决定的，要想提高灵敏度，应该改变检测波长或者改变监测器，要么对样品进行衍生。

谢谢l!
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4楼2008-06-06 09:52:08
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wwhong7217

金虫 (小有名气)
★
dnp(金币+1,VIP+0):鼓励参与讨论……^_^
同意1楼的
建议先扫描波长,是否在200nm处有最大吸收,如果样品没有紫外吸收,就换检测器,或衍生化后有吸收
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5楼2008-06-06 10:39:45
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teachen

银虫 (小有名气)
建议先做全扫描，200NM波长太短，考虑一下衍生
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6楼2008-06-06 10:51:04
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liyuan_scu

引用回帖:
Originally posted by wwhong7217 at 2008-6-6 10:39:
同意1楼的
建议先扫描波长,是否在200nm处有最大吸收,如果样品没有紫外吸收,就换检测器,或衍生化后有吸收

是这样的，我刚才打错了，是220nm，在此波长下是有紫外吸收峰的。用HPLC测定就是响应太小，峰面积小。那是不是要衍生？我想请问一下，衍生了为什么会提高灵敏度呢？对不起，我是新手，很多问题不是很明白！
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7楼2008-06-06 12:32:15
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hyj8226

银虫 (小有名气)
★
dnp(金币+1,VIP+0):谢谢，鼓励参与讨论……^_^
衍生就是在柱前或者柱后加入一些其他的试剂，通过改变目标物的结构达到增加吸光度的目的。你可以查查相关资料，看看可不可以用其他的检测器，以此提高灵敏度。
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8楼2008-06-06 12:57:37
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