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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 农杆菌提质粒得率非常低
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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fengyan

木虫 (小有名气)

[交流] 农杆菌提质粒得率非常低

我近期用转化过的农杆菌提取质粒，质粒为15Kb左右，但每次得到的条带都非常微弱，用简单的紫外分析仪直接肉眼可以看到，但用凝胶成像系统就不能照出来，非常郁闷，哪位高手指点一下该怎么提取，万分感谢！

[ Last edited by fengyan on 2008-6-5 at 10:53 ]
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1楼 2008-06-05 10:15:10
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fengyan

木虫 (小有名气)
谢谢！我是要做转基因用的，想做PCR鉴定一下，转化植物

[ Last edited by fengyan on 2008-6-5 at 14:55 ]
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3楼2008-06-05 14:54:12
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轻5飞扬

金虫 (正式写手)
呵呵,农杆菌就这样,提的一般都不会好,不知道你是想做什么,如果要鉴定的话是一定要把农杆菌质粒回转E.coli再鉴定,所以尽管提的少也没有问题,直接取1微回转就OK了
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2楼2008-06-05 11:45:03
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annwt

木虫 (正式写手)
如果转基因用，最好还是回复动员酶切鉴定，PCR不可靠，现在严谨些，后续工作就有基础。
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4楼2008-06-05 18:06:15
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fengyan

木虫 (小有名气)
谢谢啦！已经提出来了，只是量比较少以前点样量太少看不清楚，加大后就能看清了。下一步再吸取你们的建议回转一下！
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5楼2008-06-18 10:32:02
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