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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 重组质粒转到BL21（DE3）中用T7检测没条带，用特异引物检测有条带，怎么回事
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残剑流霜

木虫 (初入文坛)

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ginnyzhuzhu: 金币+2, ★有帮助 2015-01-21 11:09:48
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-21 21:15:55
BL21是可以提质粒的，你直接提个质粒再酶切试一下看看，切得出来条带大小正确就应该没啥问题
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11楼2015-01-21 11:06:35
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ginnyzhuzhu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 残剑流霜 at 2015-01-21 11:06:35
BL21是可以提质粒的，你直接提个质粒再酶切试一下看看，切得出来条带大小正确就应该没啥问题

好的，谢谢！
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12楼2015-01-21 11:08:52
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zshw_001

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-21 21:16:00
假阳性，挑的菌不正确，从涂板吧。
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永远相信未知的总是美好的！
13楼2015-01-21 17:36:19
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竹子小小

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-21 21:16:05
直接送一个去测序就知道怎么回事了。
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14楼2015-01-21 17:41:32
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ginnyzhuzhu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by zshw_001 at 2015-01-21 17:36:19
假阳性，挑的菌不正确，从涂板吧。

提了质粒检测，酶切，用T7，特异引物检测都正确，唯一没条带的就是用T7检测的菌液pcr。。。。这样还不能确保是阳性菌吗？
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15楼2015-01-25 11:40:08
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ginnyzhuzhu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 残剑流霜 at 2015-01-21 11:06:35
BL21是可以提质粒的，你直接提个质粒再酶切试一下看看，切得出来条带大小正确就应该没啥问题

提了质粒酶切检测了，大小没问题！但是后面做表达，跑蛋白，蛋白大小不对这是啥情况
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16楼2015-01-25 11:41:22
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