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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 基因敲除
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qindanxiu

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因敲除 已有1人参与

大家有没有遇到过插入突变和缺失突变出现不一样的表型的情况，转座子突变后，金葡溶血消失，但是缺失突变敲除该基因后，金葡的溶血没有变化。大家有没有做过敲除的啊？讨论一下
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我一直相信梦想的力量
1楼 2015-01-17 21:20:11
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神
这个应该具体问题具体分析吧，看你敲的什么基因
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2楼2015-01-18 23:02:40
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qindanxiu: 金币+20 2015-01-20 21:32:15
可能插入突变影响了上下游基因
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做一个阳光、开朗的小和尚
3楼2015-01-19 09:03:27
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qindanxiu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhaozhibozhi at 2015-01-19 09:03:27
可能插入突变影响了上下游基因

插入突变已经鉴定是插入到这个基因，这个基因与下游的基因转录方向不一样，怎么会影响他的上下游基因呢，奇怪
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我一直相信梦想的力量
4楼2015-01-20 21:29:14
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qindanxiu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhaozhibozhi at 2015-01-19 09:03:27
可能插入突变影响了上下游基因

这个上下游基因之间间会有几个碱基，而且会有终止密码子应该没大有可能吧？
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我一直相信梦想的力量
5楼2015-01-20 21:36:05
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qindanxiu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dllchina at 2015-01-18 23:02:40
这个应该具体问题具体分析吧，看你敲的什么基因

谢谢，敲的是一个别人没有研究过的基因，大约300bp左右，不是很大，您觉得有什么可能的原因呢
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我一直相信梦想的力量
6楼2015-01-20 21:36:48
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by qindanxiu at 2015-01-20 21:29:14
插入突变已经鉴定是插入到这个基因，这个基因与下游的基因转录方向不一样，怎么会影响他的上下游基因呢，奇怪...

敲除突变的话，应该是in-frame敲除，可以保留待敲基因N和C端部分碱基（切记：一定要in-frame），这样不会对上下游基因造成影响。

插入突变，是很容易影响下游基因的，即通常所说的“极性效应”；一般可能是下游基因的转录受到影响。但是，你的下游基因转录方向不一样，应该影响不大（不太确定）；是不是多拷贝插入了？？？？
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做一个阳光、开朗的小和尚
7楼2015-01-21 11:26:43
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qindanxiu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhaozhibozhi at 2015-01-21 11:26:43
敲除突变的话，应该是in-frame敲除，可以保留待敲基因N和C端部分碱基（切记：一定要in-frame），这样不会对上下游基因造成影响。

插入突变，是很容易影响下游基因的，即通常所说的“极性效应”；一般可能是下游 ...

谢谢大神，我的是转座子插入突变，有抗性基因。然后缺失突变是利用同源重组的方法替换这个基因，整个基因被敲除。
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我一直相信梦想的力量
8楼2015-01-27 16:35:33
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