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zf851

金虫 (小有名气)

[交流] 有谁做过:ATP ADP AMP的分析么?

我们查阅了很多资料 关于代谢物分析方法的
其中
1.很多医学类的文献里头用的是 缓冲液直接冲洗 可问题是C-18柱 用100%的50mmol磷酸缓冲液冲洗 会不会造成柱塌陷和柱效的下降呢?有问过一个仪器的工程师 他说100%水 和 100%缓冲液冲洗柱子是有所不同的 可有没有人能告诉下 不同在哪里呢?

2.缓冲液浓度 高低对物质分离有什么影响么?即25mmol的缓冲液 和50mmol缓冲液 有什么区别么?

3.有没有人做过ATP ADP AMP的 分离么 因为 我们做了标样 发现ADP 和 ATP的保留时间 基本是重叠在一起的 我们的色谱条件如下  流动相A:50mmol磷酸缓冲液+1%三乙胺=80%  流动相B:甲醇20% ;等度洗脱 柱温箱40摄氏度; 有没有什么建议?

谢谢提供建议的朋友^@^
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andia

木虫 (著名写手)

分离腺苷核苷酸就是要用盐作为buffer的,
我们用的buffer就是很多盐的,
你这种色谱柱长时间用水冲柱效会变差的,
找一般英文的文献来参照,英文文献里测这三种物质的还是很多的,
我们测的虽然ATP和ADP的峰靠的很近,但还是能够很明显的分开的,
如果你参照的文献可以分开,但你实际又分不开,说明你的柱子的分离效果可能有所欠缺,
加油吧,这个不难,应该可以搞定的
2楼2008-06-16 08:37:31
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