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ycwang1981

金虫 (小有名气)

有梦想的小虫子

[交流] 核酸电泳知识求助

单链环状DNA和单链线状DNA如何分离? 在琼脂糖电泳时,单链与双链的电泳速度差别在那里?有什么可以阻止在低温条件下,DNA链的复性?
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梦想有一天,可以无忧无虑的生活
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ycwang1981

金虫 (小有名气)

有梦想的小虫子

我们是已经用碱变性过了的样品,想跑电泳来看能不能分离开来,而且想知道条带大约的位置在那里,

我们用的是345bp的ds DNA

谢谢
梦想有一天,可以无忧无虑的生活
4楼2008-06-03 10:36:21
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blackeyedliming

★ ★
ycwang1981(金币+1,VIP+0):你能回答的再准确一些吗
ycwang1981(金币+1,VIP+0):你能回答的再准确一些吗
相同分子量的环状DNA比线状DNA移动速度要快一些,如果环状的分子量比较大就不好说了,低温情况下高酸高碱,纯水都会使核酸变性,你说的意思是想在低温情况下,通过电泳手段分离单链环状DNA和单链线状DNA吗?
2楼2008-06-03 10:08:31
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blackeyedliming

电泳缓冲液是不能使核酸变性的,所以我不清楚你问的问题中单链和电泳有没有关系,你想达到的目的是什么
3楼2008-06-03 10:27:37
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ymru

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
ycwang1981(金币+3,VIP+0):多谢支持
DNA变性是指双螺旋之间氢键断裂,双螺旋解开,形成单链无规则线团,因而发生性质改变(如粘度下降,沉降速度增加,浮力上升,紫外吸收增加等),称为DNA变性。加热、改变DNA溶液的pH、或受有机溶剂(如乙醇、尿素、甲酰胺及丙酰胺等)等理化因素的影响,均可使DNA变性。

在低温下,可以采用酸碱变性,使得DNA处于单链状态
5楼2008-06-04 17:11:17
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