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新虫 (小有名气)

[求助] 定量PCR 已有1人参与

各位大神，我最近在做定量PCR，用的是SYBR法，做绝对定量，但是扩增曲线总是没有出现平台期，我想请问这样的结果能用吗？因为我听说读数是在对数期，没有出现平台期会不会影响结果？

扩增曲线.jpg

1楼 2015-01-15 16:58:39

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木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
悠悠飘杨(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-01-15 19:58:24
悠悠飘杨: 金币+4, ★有帮助 2015-06-24 08:56:51

循环圈数一般设为40，遇到基因表达丰度比较低的也可以考虑设为45个循环；
Ct值一般在15～33是可以接收的，内参基因的选择时，一般都在15个循环左右，不会超过20；

2楼2015-01-15 19:11:34

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新虫 (小有名气)

引用回帖:

2楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2015-01-15 19:11:34
循环圈数一般设为40，遇到基因表达丰度比较低的也可以考虑设为45个循环；
Ct值一般在15～33是可以接收的，内参基因的选择时，一般都在15个循环左右，不会超过20；

我做的是绝对定量，而且超过35个循环就会有非特异性产物，所以不能用40至45个循环

3楼2015-01-16 08:52:19

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