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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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悠悠飘杨

新虫 (小有名气)

[求助] 定量PCR 已有1人参与

各位大神,我最近在做定量PCR,用的是SYBR法,做绝对定量,但是扩增曲线总是没有出现平台期,我想请问这样的结果能用吗?因为我听说读数是在对数期,没有出现平台期会不会影响结果?

定量PCR
扩增曲线.jpg
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红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
悠悠飘杨(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-01-15 19:58:24
悠悠飘杨: 金币+4, 有帮助 2015-06-24 08:56:51
循环圈数一般设为40,遇到基因表达丰度比较低的也可以考虑设为45个循环;
Ct值一般在15~33是可以接收的,内参基因的选择时,一般都在15个循环左右,不会超过20;
2楼2015-01-15 19:11:34
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悠悠飘杨

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2015-01-15 19:11:34
循环圈数一般设为40,遇到基因表达丰度比较低的也可以考虑设为45个循环;
Ct值一般在15~33是可以接收的,内参基因的选择时,一般都在15个循环左右,不会超过20;

我做的是绝对定量,而且超过35个循环就会有非特异性产物,所以不能用40至45个循环
3楼2015-01-16 08:52:19
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