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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » TA克隆，连接问题
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superarm

金虫 (正式写手)

[交流] TA克隆，连接问题

最近做实验很不顺，急死我了。连接2-4kb的片断连不上，筛出的总是空载体 ，我用的是promega的PGEM-T载体，TOP10感受态细胞。载体和感受态都没问题。请问各位高手有什么好的办法连接2K以上的大片断？
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与分子生物学的同仁一起遨游科学的海洋！
1楼 2008-06-02 23:16:14
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RyanV

铁虫 (初入文坛)
★ ★
superarm(金币+2,VIP+0):thx 5-20 23:26
我也用过啊    不错啊

PCR产物是单一条带，没有引物二聚体时  直接连接载体
PCR产物不是单一条带，或者有引物二聚体时  先回收目的带，再连接载体
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2楼2008-06-03 11:56:53
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mayw

铜虫 (初入文坛)
做1-3k的还行，但是最近做一个4.2k的一直做不出来，同问！
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3楼2009-05-20 18:19:27
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mayw

铜虫 (初入文坛)
忘了说我用的PMD18t
感受态用得JM109
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4楼2009-05-20 18:20:21
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
4度连接过夜
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5楼2009-05-20 18:28:58
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