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nora9908

金虫 (小有名气)

[求助] 请教荧光偏振法测定微生物细胞膜流动性的几个问题

请教问题如图所示,用DPH做的细菌的细胞膜流动性,问题如下:
1. 做了不加DPH仅有细胞的对照(CK)和加了DPH含有细胞的样品(sample),但是,加了DPH之后,光谱发生红移,和对照出来发射光谱不在同一个波长处。这样的话,要计算sample的偏振值,还需要减去CK的偏振值吗?
2. 最大的红色的峰和最小的峰,他们的基线不一样,大的峰基线高,计算的时候,需要求大峰的相对高度吗?
另外,有时候,换一批样品,峰型不明显,像个大抛物线,峰底很宽,这是什么原因呢,使细胞浓度太低引起的吗?

初次接触这方面的实验,很多地方不懂,希望得到虫友的帮助,不胜感激!

请教荧光偏振法测定微生物细胞膜流动性的几个问题
QQ图片20150111174306.jpg
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sclspr

新虫 (初入文坛)

您好,请问你是用LS55测的荧光偏振吗?最近也在测荧光偏振,万望指点一二。先谢过!
2楼2015-05-28 17:03:25
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