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wang1990tl

金虫 (小有名气)

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[求助] 茶多糖水解单糖分析问题求助

各位前辈，我想用粗提的普洱茶茶多糖做水解条件摸索。
   用乙酸乙酯萃取除去部分色素后，经过二氯甲烷（氯仿一直买不到）、正丁醇除去蛋白之后得到的粗多糖（褐色），总糖含量23.4%、酚类物质18.8%、蛋白含量16.2%。
   20mg粗多糖用2ml、2M的TFA水解。水解过程中有褐色沉淀，而且水解液也有颜色，我做了90℃，4、8、12h的水解，颜色越来越浅。水解液用氮气吹干TFA，DD水复溶，每200μl分装一个EP管冻干。
   氮吹结束后水解管底部都是褐色的固体贴在水解管上，不知道一般水解之后是什么样子的，而且复溶之后离心有沉淀（在水解之后，水解液我都过了0.22μm的滤膜、12000rpm离心了5min）。
   冻干的时候发现有黑色颗粒，特别是8h的黑色颗粒最多，4h和12h的水解液在冻干后是浅褐色颗粒，看看网上讨论是碳化了。
   不知道我的操作过程有没有问题，发酵实验室从来没有人做过单糖分析，还请各位能帮帮忙！金币不多，见谅！

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