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lzangelfish银虫 (小有名气)
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[交流]
[交流求助]酶的纯化
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各位虫子好，我做的是大豆脂肪氧和酶LOX1的分离纯化 此酶的分子量大约是102KDa，等电点约在5.70 按文献来说应采用DEAE Sephadex A 50 在0.02M，pH6.8的PBS下进进行分离纯化。 而后用0.02-0.17 0.17-0.23的PBS分部梯度洗脱 我想问一下各位虫子DEAE Sephadex A 50 的上样量一般柱体积的多少？我柱体积约90ml，应上多少mg蛋白？什么浓度？ 另外在0.02-0.17时流速为30ml/H.酶应在0.2M左右出峰，我是否应在第二部梯度洗脱时放慢流速？ |
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