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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问什么是酶切
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翼在天

银虫 (小有名气)
★
qaz139687(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-01-08 20:48:24
引用回帖:
8楼: Originally posted by qaz139687 at 2015-01-08 18:42:34
酶是不是就是PCR体系加的taq酶，那在设计引物前段着么加酶切位点的特定序列呢...

taq酶是DNA连接酶，在PCR体系中是为了以引物为模板，扩增出你所要的目的片段。
至于你说的前面加的酶切位点是为了PCR拿到目的片段以后，进行下一步操作时用的。得到的目的片段要和别的操作载体进行连接，这时候才用到内切酶，进行酶切。
这些东西你找本分子生物学或者基因工程的书好好看看，都有的。
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11楼2015-01-08 19:30:43
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qaz139687

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by Carpedime at 2015-01-08 19:18:31
首先，你到底想干嘛呢？

摇菌之后的菌液，需要做菌液PCR,酶切，然后送测吗
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12楼2015-01-08 21:41:52
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hyuqing

捐助贵宾 (小有名气)

Enriching beads

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by qaz139687 at 2015-01-07 22:04:08
这个我知道 我的意思是在什么情况下酶切，是不是我设计的引物就相当于这把剪刀？...

不是的(⊙o⊙)哦，酶切是指用酶切断指定的位点，如果是剪刀的话，应该是说那个酶。。

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13楼2015-01-08 22:24:08
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Aska飞鸟

木虫 (小有名气)
不好意思，看成雷切了
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飞跃无极限鸟会返自然
14楼2015-01-08 22:46:42
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46，XY

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
酶切当然是用酶  切开你的目的片段了，酶是你的剪刀。
一般设计引物的时候会加上酶切位点，也就是你下剪刀的地方。

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15楼2015-01-08 22:55:38
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Carpedime

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by qaz139687 at 2015-01-08 21:41:52
摇菌之后的菌液，需要做菌液PCR,酶切，然后送测吗...

酶切是用特定的内切酶识别特定的序列并在特定的位点打断磷酸二酯键，揍酱～

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16楼2015-01-09 00:07:58
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可帅儿

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by qaz139687 at 2015-01-07 22:04:08
这个我知道 我的意思是在什么情况下酶切，是不是我设计的引物就相当于这把剪刀？...

大哥，引物不是剪刀，内切酶才是。。。。
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追随自己的心！不要做让自己后悔的事！
17楼2015-01-09 12:35:43
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墨尔本机器

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

qaz139687同学，你怎么到处问些这么基本的问题，都研究生了吧？
酶切本科课本有讲过吧？有些基本的问题可以先问下度娘然后再来求助，效率更高一些！
你设计引物拉出你要的片段那不叫酶切，酶切要有固定酶切位点的，不是随便什么序列都可以切开的。酶切一般做重组载体的时候用的，把我的一个DNA片段和一个载体同时酶切，然后两个产物有相同酶切末端，就可以在酶的作用下粘合。最常用的时候是做原核表达的时候，你不是有个基因鳃表达最高吗，你可以查看原核表达步骤，对这个基因进行原核表达，分析功能。
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18楼2015-03-30 17:07:42
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781055707

木虫 (著名写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by Aska飞鸟 at 2015-01-08 22:46:42
不好意思，看成雷切了

高，雷切貌似我还知道一点。

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采菊东篱下，悠然见南山。
19楼2015-03-30 18:19:56
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lxzk

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 翼在天 at 2015-01-08 19:30:43
taq酶是DNA连接酶，在PCR体系中是为了以引物为模板，扩增出你所要的目的片段。
至于你说的前面加的酶切位点是为了PCR拿到目的片段以后，进行下一步操作时用的。得到的目的片段要和别的操作载体进行连接，这时候才 ...

这位童鞋，taq是DNA聚合酶不是连接酶，不会是被传染了吧？

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20楼2015-03-31 09:05:09
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