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qaz139687

新虫 (小有名气)

[求助] 请问什么是酶切已有9人参与

是不是就是平时设计引物的上游引物跟下游引物,这2个把cDNA切开就叫酶切?
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墨尔本机器

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

qaz139687同学,你怎么到处问些这么基本的问题,都研究生了吧?
酶切本科课本有讲过吧?有些基本的问题可以先问下度娘然后再来求助,效率更高一些!
你设计引物拉出你要的片段那不叫酶切,酶切要有固定酶切位点的,不是随便什么序列都可以切开的。酶切一般做重组载体的时候用的,把我的一个DNA片段和一个载体同时酶切,然后两个产物有相同酶切末端,就可以在酶的作用下粘合。最常用的时候是做原核表达的时候,你不是有个基因鳃表达最高吗,你可以查看原核表达步骤,对这个基因进行原核表达,分析功能。
18楼2015-03-30 17:07:42
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红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2015-01-07 22:47:09
你这也太不专业了。酶切就相当于剪刀,不过这个剪刀识别固定的碱基序列,也就是在固定的序列进行切割
2楼2015-01-07 21:54:24
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qaz139687

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2015-01-07 21:54:24
你这也太不专业了。酶切就相当于剪刀,不过这个剪刀识别固定的碱基序列,也就是在固定的序列进行切割

这个我知道 我的意思是在什么情况下酶切,是不是我设计的引物就相当于这把剪刀?
3楼2015-01-07 22:04:08
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2015-01-07 22:47:16
如果要进行后续的酶切连接到特定的表达载体的话,设计的引物应该包含相应表达载体多克隆位点上某个限制性内切酶的酶切位点,设计的引物不是”剪刀“,而是包含“剪刀”的靶点
医学&统计学
4楼2015-01-07 22:11:16
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