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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 化学分析 » HPLC分析结果求得碳含量和TOC测定的结果对不上号
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macjr

银虫 (正式写手)

[求助] HPLC分析结果求得碳含量和TOC测定的结果对不上号

最近测定了一批植物根系分泌物，测定出草酸的含量有700mg/L，但是我用TOC测定的碳的含量只有20mg/L左右，这完全对不上啊，同时我又做了一个700mg/L左右的纯草酸去测定碳的含量，结果还是符合的，有170mg/L，我想知道为什么会这样，我后来在一次补测的分泌物的HPLC的结果，结果和第一次的差不多，求大神指教、、
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1楼2015-01-07 16:57:26
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liwentao2010

荣誉版主 (文坛精英)

山涛

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
macjr: 金币+5 2015-01-07 21:42:36
macjr: 金币+5 2015-01-07 21:46:04
TOC测定原理有多种，过硫酸盐-紫外氧化法、燃烧法（包括NPOC、TC-IC）等，测定复杂物质最好选择燃烧法（TC-IC）精准度有保证。此外HPLC测定草酸含量时，里面含有其他物质干扰，建议先提取高纯度草酸，便于精准测定。
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加油！
3楼2015-01-07 20:34:40
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
说明有干扰，在草酸出峰的位置有其他物质的峰叠加。
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macjr
雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
2楼2015-01-07 16:59:28
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
macjr: 金币+10 2015-01-09 12:16:20
引用回帖:
11楼: Originally posted by macjr at 2015-01-09 10:44:55
就是什么牌子的交换柱，有什么规格特性这些。搞不懂，没法购买了。。...

应该是阴离子交换柱，我写错了。你百度一下，找几家供应商打电话咨询一下。
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快乐不需要走遍天涯去寻找，只需播一粒种子在脚下。
12楼2015-01-09 11:11:54
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ningxiao17

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by macjr at 2015-01-26 13:06:13
需要合适的柱子...

SB-C18 Analytical HPLC Column 4.6x250 公司给我推荐这个柱子 我准备买你看合适不 打折后4119 是不是贵了
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16楼2015-01-27 09:27:26
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macjr

银虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by ningxiao17 at 2015-01-27 09:27:26
SB-C18 Analytical HPLC Column 4.6x250 公司给我推荐这个柱子 我准备买你看合适不 打折后4119 是不是贵了...

其实柱子我也不清楚，我也是那边的人告诉我的。文献上都有的，4119其实很便宜了。。。一般的柱子都要78千甚至上万。做这个一定要符合分离有机酸的柱子。。
C18 Inertsil ODS-SP column (4.6 × 250 mm, 5 µm Shimadzu, Japan)我用的柱子。仪器时岛津的
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17楼2015-01-28 09:11:00
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macjr

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liwentao2010 at 2015-01-07 20:34:40
TOC测定原理有多种，过硫酸盐-紫外氧化法、燃烧法（包括NPOC、TC-IC）等，测定复杂物质最好选择燃烧法（TC-IC）精准度有保证。此外HPLC测定草酸含量时，里面含有其他物质干扰，建议先提取高纯度草酸，便于精准测定。

toc我用的岛津的那个toc仪器测定的，hplc测定草酸有干扰，我根系分泌物收集后直接旋转蒸发浓缩，提纯草酸？如何提纯啊，我看到文献上测定根系分泌物的时候直接上HPLC测定，都没有提到过要提纯某种有机酸
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4楼2015-01-07 21:42:31
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macjr

银虫 (正式写手)
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引用回帖:
2楼: Originally posted by archbishop at 2015-01-07 16:59:28
说明有干扰，在草酸出峰的位置有其他物质的峰叠加。

我在草酸的峰上只看到一个峰，难道有隐藏的？并没有出现什么重合的迹象
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5楼2015-01-07 21:45:10
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
引用回帖:
5楼: Originally posted by macjr at 2015-01-07 21:45:10
我在草酸的峰上只看到一个峰，难道有隐藏的？并没有出现什么重合的迹象...

不一定能看出来
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
6楼2015-01-07 21:55:39
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
macjr: 金币+15 2015-01-08 11:30:13
草酸极性较强，保留性应该很差，出峰很快。你的根系分泌物应该组分很杂，难免有其他组分和草酸出在一起，这样你HPLC检出的含量就偏高。建议你优化方法再试试。
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7楼2015-01-08 09:10:39
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macjr

银虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by archbishop at 2015-01-07 21:55:39
不一定能看出来...

谢谢
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8楼2015-01-08 11:30:25
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macjr

银虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by kf1009 at 2015-01-08 09:10:39
草酸极性较强，保留性应该很差，出峰很快。你的根系分泌物应该组分很杂，难免有其他组分和草酸出在一起，这样你HPLC检出的含量就偏高。建议你优化方法再试试。

我想把分泌物给纯化了，把其中的有机酸给萃取出来，采用阴阳离子交换柱，但是不知道采用什么交换柱比较好，能推荐一下么
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9楼2015-01-09 10:14:32
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by macjr at 2015-01-09 10:14:32
我想把分泌物给纯化了，把其中的有机酸给萃取出来，采用阴阳离子交换柱，但是不知道采用什么交换柱比较好，能推荐一下么...

阴阳离子交换柱
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10楼2015-01-09 10:33:38
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