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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 交流：琼脂也会变性！
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phytoman

银虫 (小有名气)

[交流] 交流：琼脂也会变性！

把帖子重新编辑一下，感谢各位的帮助。
今天晚上发现一个问题，难道琼脂也会变性！我配的MS培养基加了6g琼脂，由于过低，仅有4.4。结果琼脂不凝！
接下来是个意外，我把pH值又调到5.8，加热，煮沸，培养基还是不凝！重新加过6g/L琼脂则又会凝固，原来琼脂也会变性！
想到实验室一个同学遇到的问题，更加确定了这个认识。他发现灭菌后琼脂不凝固，在培养基中又加4g/L的琼脂还是不凝，于是就怀疑是琼脂的质量问题，当时问我是什么问题我也不确定。现在可以确定是因为pH值低导致琼脂变性，而非琼脂质量问题。

[ Last edited by phytoman on 2008-5-30 at 10:54 ]
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1楼 2008-05-29 21:33:41
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zjlgdxgqp

培养基煮过后会酸化的，灭菌之前条pH的时候最好稍微高点；还有培养基里加激素的话最好加完激素在条pH！
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2楼2008-05-29 23:01:21
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sophiemyn

木虫 (著名写手)
很明显,你一开始的pH挑的太低了，虽然后来加了那么多琼脂，不过我想你的培养基也不能用了吧，硬度太大也不利于植物生长了。
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3楼2008-05-29 23:29:02
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coffee424907

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by phytoman at 2008-5-29 21:33:
今天晚上搞定了一个MS培养基的问题，与大家分享一下。
我配的MS培养基加了6g琼脂，pH计调至5.8，121°灭菌20min分钟后，不凝。
郁闷死了，检查了一下是pH值的问题！灭菌后pH值仅有4.4.
接下来是个意外，我把pH ...

这叫解决问题？
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4楼2008-05-30 08:18:33
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baohongduo

银虫 (正式写手)
加入琼脂之前调PH值，最好把PH值调高一些！
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5楼2008-05-31 10:46:21
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li3564617

金虫 (小有名气)
加热时间长了会使琼脂老化，当然就不凝了，也可能是你用的琼脂有质量问题，我们用的琼脂粉没出现过类似问题
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6楼2008-05-31 19:31:36
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xhyang200

要想琼脂凝固，PH值要在6.0以上，而且灭菌后PH会稍有下降，最好调的高一点，不过有时候琼脂的质量问题也可能导致不凝，另外，LZ的琼脂加量是多少啊，我们一般琼脂粉加2%，琼脂条2.5%甚至再多些，你怎么才0.6%啊
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7楼2008-06-03 09:25:17
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hulqi

金虫 (正式写手)
对，不一定是琼脂的问题，一般要加2％，琼脂加的过少也是造成培养基无法凝固的原因之一……
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8楼2008-06-04 00:49:43
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raindrop8316

金虫 (正式写手)

......

LZ让我想起了某个人说他发现QQ的一个大秘密......
另外，琼脂条根本不需要加到2%。我们配了N吨的培养基，琼脂从来都是1.5%。
如果要配低pH值的固体培养基，我们都是把琼脂和其他成分分开配，浓度分别翻倍，灭菌后，倒平板前再1：1混合。而且，培养基要冷却到60度左右时再混合，否则温度过高它依然不会凝固。
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书到用时方恨少 钱到月底不够花
9楼2008-06-04 10:29:27
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bired

木虫 (著名写手)
没有那么严重，琼脂的浓度和你选用的强度不一样。我的就要5g/l就足够了。
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10楼2008-06-04 14:17:53
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