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[求助]
wb碱性磷酸酶显色,结果有些怪,高手帮忙给看看是什么问题
电泳,100V,80min
转膜100V,90min
封闭5%脱脂牛奶,37度1h
一抗(1:1000,用过5,6次)4度过夜
二抗(1:1000,新配)37度1h
显色:碱性磷酸酶缓冲液5ml NBT33ul BCIP13.5ul
新配碱性磷酸酶缓冲液,NBT(索莱宝,50mg/ml ,用70%DMF配置,新配)BCIP(50mg/ml 100%DMF配制)
结果就成了图片上的这样,没有清晰的条带,但干燥后仔细看也有,但是很昏,这是怎么回事,高手请赐教
![wb碱性磷酸酶显色,结果有些怪,高手帮忙给看看是什么问题]()
1.jpg
![wb碱性磷酸酶显色,结果有些怪,高手帮忙给看看是什么问题-1]()
CAM01137.jpg |
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