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taxue314

新虫 (初入文坛)

[求助] 代谢酶问题 已有1人参与

本人在做代谢稳定性实验时,进液相不加NADPH组和加NADPH组在不同时间段的峰面积都差不多,是否能说明我的药物可能不是CYP450酶代谢的?
另外这两组在0分钟孵育液中取样进液相时峰面积均为600作用,90分钟后取样进液相峰面积为400左右,能否说明我的药代谢了,还是系统误差?
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forvelily

新虫 (初入文坛)

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代谢稳定性实验时,底物浓度尽量低,不然可能超出代谢能力。
实验应加上阳性对照,确保反应体系没有没有。
多设几个时间点,作图观察结果。
2楼2014-12-25 09:37:48
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taxue314

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by forvelily at 2014-12-25 09:37:48
代谢稳定性实验时,底物浓度尽量低,不然可能超出代谢能力。
实验应加上阳性对照,确保反应体系没有没有。
多设几个时间点,作图观察结果。

那我这样做可不可以:分四组阳性对照组(只用CYP3A4的底物验证酶是否有活性),灭活组(肝微粒体高温灭活后再加药孵育),药物组加NADPH,药物组不加NADPH,分别在孵育0,5,10,20,30,45,60,75,90,105,120min时取样进液相,算底物消除量,不过我要做什么图才能说明我的药是否有代谢呢?
3楼2014-12-25 16:10:43
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forvelily

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
taxue314: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-12-29 17:19:36
根据1级消除的公式呀,X轴为时间,Y轴为底物参量的LN,斜率即为-k。
4楼2014-12-26 16:12:14
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