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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 跪求解答
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

[求助] 跪求解答 已有1人参与

发酵转化重复不出以前的结果：
第一：种子问题
以前接完以后PH值一直处于上升阶段，放冰箱两个月后出现了以下情况，PH值先上升后下降，直到现在一直下降，为什么？所有培养基都没有改变（以前接的斜面是从甘油管直接转接的，之后放冰箱直到现在）。
第二：底物转化
现在是重复以前的实验，之前底物（甾醇）为2.5%,转化后产物为11-12g/L，现在转化7天也就才7g/L，以往入冰箱半年也不会出现这样的情况。菌种活力下降的怎么这么快呢？
现在再重新筛选有些来不及了，请虫友们帮帮怎样才能尽快解决这些问题。
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希望大家多多交流。
1楼 2014-12-19 11:36:49
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
张香玲1017: 金币+20, ★★★很有帮助 2014-12-20 13:41:32
一直变酸，说明菌株活力越来越低了，细胞裂解了。
只能复壮菌株了，
其他我就不知道了
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2楼2014-12-19 13:45:33
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨
引用回帖:
2楼: Originally posted by dllchina at 2014-12-19 13:45:33
一直变酸，说明菌株活力越来越低了，细胞裂解了。
只能复壮菌株了，
其他我就不知道了

复壮菌株就是直接做平板分离吗？还是采用其它方法，着急中。谢谢！
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希望大家多多交流。
3楼2014-12-19 13:52:50
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨
引用回帖:
2楼: Originally posted by dllchina at 2014-12-19 13:45:33
一直变酸，说明菌株活力越来越低了，细胞裂解了。
只能复壮菌株了，
其他我就不知道了

但是在做发酵转化的时候，PH值先降大概两天左右后就一直上升，之后也不再降。发酵以前是PH先降，降的过程中我们就开始控PH值，发酵大概四天左右PH值才开始上升。
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希望大家多多交流。
4楼2014-12-19 14:00:54
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神
引用回帖:
3楼: Originally posted by 张香玲1017 at 2014-12-19 13:52:50
复壮菌株就是直接做平板分离吗？还是采用其它方法，着急中。谢谢！...

最好当然是液体摇起来啊
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5楼2014-12-19 16:36:15
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨
引用回帖:
5楼: Originally posted by dllchina at 2014-12-19 16:36:15
最好当然是液体摇起来啊...

摇起来后再做平板分离是吗？划线法和涂布法那个更好些呢？
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希望大家多多交流。
6楼2014-12-19 16:41:47
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dongguolang

新虫 (小有名气)
加糖了，产酸，培养基pH就下降，
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7楼2014-12-20 13:00:39
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 张香玲1017 at 2014-12-19 16:41:47
摇起来后再做平板分离是吗？划线法和涂布法那个更好些呢？...

划线好一些，也方便你找到长势好的克隆
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8楼2014-12-23 23:39:25
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨
引用回帖:
7楼: Originally posted by dongguolang at 2014-12-20 13:00:39
加糖了，产酸，培养基pH就下降，

种子培养基和发酵培养基中一直有糖的，而且其它营养成分也没有改变。
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希望大家多多交流。
9楼2015-01-04 10:13:31
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