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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

[交流] 一个2.8kb的片段一直扩增不出来的原因?急啊

从酵母基因组扩增一个2。8KB的基因片段,基因序列已知,可就是无法扩增出来。有时能扩出来吧但是条带很弱,用这个很弱的条带再做PCR也扩不还出来。有文献说可能是因为这个基因丰度很低的原因。

请问是这个原因吗?有什么办法能扩出这个基因呢?两步法可以吗?
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nmnqwy

银虫 (正式写手)

5楼2008-05-24 16:18:59
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张力民

铜虫 (小有名气)

两步法可能管用,你试试。用touch down pcr和冷启动pcr试试
2楼2008-05-24 14:29:07
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

什么叫做touch down pcr?
3楼2008-05-24 14:32:09
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

touch down pcr好像是专门为了减少非特异用的吧,可是我不是非特异啊,我是扩增不出来。
4楼2008-05-24 14:41:53
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