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chin_jl

铜虫 (小有名气)

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[求助] 微生物发酵液次级代谢产物分离问题。。很急啊。。希望能有人来帮我已有4人参与

情况是这样的，我的一株链霉菌发酵液具有抑菌活性，效果比较好，那么我就想得到这个物质或是这些物质，那么就进行发酵萃取，目前主要是为了摸萃取条件，就小量发酵萃取试试，发酵液为100ml，萃取液等体积，萃取的时候进行了分段萃取，用了石油醚，氯仿，乙酸乙酯和正丁醇，在萃取过程中，石油醚乳化现象比较严重，就萃取了两次然后水相，有机相，中间层都保留了，，其他实际乳化比较轻，就都保留了水相和有机相，各个有机相经旋蒸浓缩后，用各自的萃取剂溶解，然后各个水相，中间层，有机相过0.22微米的滤膜除菌，进行抑菌活性的追踪。
结果不尽人意，萃取完之后的水相基本都有抑菌活性，也就是说基本没把物质从发酵液里萃取出来，只有石油醚的水相活性貌似减小，不过不是非常明显，奇怪的是石油醚的乳化层貌似有抑菌活性，大小跟抑菌强度和石油醚的水相相当，但是石油醚的粗提物也就是有机相是一定没有抑菌活性的。。。再者就是氯仿的粗提物也多少有一些一点点抑菌活性，但是其水相抑菌活性减弱不明显。其他试剂萃取的就一点抑菌活性都没有了。。。在做抑菌活性的时候，粗提物相当于浓缩了嘛，用量为20微升，发酵液，水相和石油醚中间层用的100微升，不知道这个影响有多大。
总之，给我的感觉就是具有抑菌活性的物质及不亲脂也不亲水，当然也多少提供了一点信息，貌似这个物质能在石油醚的萃取下出来，不过但是进不了石油醚里面，也许它的亲脂能力没那么强？？？
反正现在很纠结，不知道该怎么处理了。。我现在就是用原来的各个相又做了一次抑菌活性实验，这次粗提物用量加大了一下，加了50微升，过两天才能根据抑菌圈大小来判断，，，情况大体就是这么个情况了。。不知道有没有在这方面有过研究的师兄师姐或是大神能给我指点一下。。。对于这种怎么也从发酵液里萃取不出来的物质该怎么办呢？？？？求指点啊！~~~~~~

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